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技術(shù)文章

小鼠棕色前脂肪細(xì)胞說明書

閱讀:1070          發(fā)布時(shí)間:2019-12-30

  小鼠棕色前脂肪細(xì)胞說明書,,更多產(chǎn)品請(qǐng)咨詢我公司

一,、產(chǎn)品簡(jiǎn)介

1. 產(chǎn)品名稱:小鼠棕色前脂肪細(xì)胞

2. 組織來源:棕色脂肪組織

3. 產(chǎn)品規(guī)格5×105 cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4. 細(xì)胞簡(jiǎn)介

小鼠棕色前脂肪細(xì)胞分離自棕色脂肪組織;棕色脂肪組織(brown adipose tissue)是指動(dòng)物體內(nèi)呈棕色的脂肪組織,。其中的脂肪細(xì)胞體積較小,,胞質(zhì)中有多個(gè) 較小的脂滴,并有較多的線粒體,;細(xì)胞核呈圓形,,位于細(xì)胞中央;脂肪細(xì)胞之間 的疏松結(jié)締組織中有較豐富的毛細(xì)血管和神經(jīng)纖維,。在一些動(dòng)物的幼體及成年嚙 齒類和冬眠哺乳動(dòng)物的頸部和腋部分布較多,,有時(shí)在成年家畜體內(nèi)亦可發(fā)現(xiàn)。棕 色脂肪組織,,是哺乳動(dòng)物體內(nèi)非顫栗產(chǎn)熱的主要來源,,對(duì)于維持動(dòng)物的體溫和能 量平衡起重要作用,對(duì)幼齡哺乳動(dòng)物尤為重要,。大量的研究表明棕色脂肪組織不僅具有御寒功能,,而且還會(huì)燃燒多余脂肪和糖分,產(chǎn)生熱量,,防止體內(nèi)儲(chǔ)存過多的脂肪,。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞,。前脂肪細(xì)胞呈梭形,,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力,。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系,。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,,在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),終成為成熟的脂肪細(xì)胞,。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),,可望成為軟組織缺損的有益填充物。本公司生產(chǎn)的小鼠棕色前脂肪細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約 5×105 cells/瓶,;細(xì)胞經(jīng)油紅O染色鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

5. 培養(yǎng)基信息小鼠棕色前脂肪細(xì)胞說明書

基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、FBS,、PenicillinStreptomycin等,,我們推薦使用小鼠棕色前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基,。

二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片

三,、使用方法

在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,,小鼠棕色前脂肪細(xì)胞可傳2-3代左右,隨著傳代次數(shù)的增加,,細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)老化狀態(tài),生長(zhǎng)速度減緩,,2代以內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)佳,;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4h以上,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化,;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

四,、注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通,;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。

5. 該細(xì)胞只可用于科研,。

備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考小鼠棕色前脂肪細(xì)胞說明書

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