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Annexin V流式檢測細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法
閱讀:664 發(fā)布時間:2019-12-19示例:
細(xì)胞用FITC-Annexin V / PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測效果圖,。
Jurkat細(xì)胞用1μM喜樹堿(Camptothecin) (左)或未加藥 (右)處理4h,,F(xiàn)ITC-Annexin V/PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒染色后,流式細(xì)胞儀熒光檢測,。
Annexin V-FITC單陽性細(xì)胞為早期凋亡細(xì)胞,,Annexin V-FITC和PI染色雙陽性的細(xì)胞為壞死細(xì)胞或者晚期凋亡。PI單染色陽性位裸核細(xì)胞,。
實測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型,、細(xì)胞凋亡情況,檢測儀器等的不同而存在差異,,圖中數(shù)據(jù)僅供參考,。
流式檢測細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對數(shù)坐標(biāo)軸模式備用,;
2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),,選取雙陰細(xì)胞群;
3) 在雙陰細(xì)胞門中,,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCS和SSC,,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細(xì)胞碎片,,劃出碎片門,,應(yīng)用于所有細(xì)胞;
4) 在所有細(xì)胞中,,反選碎片門,,得到所有細(xì)胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,,參照未經(jīng)藥物處理的對照組,,劃出十字門,確定不同群細(xì)胞的比例,。