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BCPAP人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

 

一,、細(xì)胞培養(yǎng)條件

 

生長特性 貼壁 凍存條件 90%FBS+10%DMSO

 

培養(yǎng)體系 DMEM+10%FBS

 

氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

 

傳代方法 1:2-1:4 傳代情況 2天換液

 

備注 收集瓶子培養(yǎng)基,，過渡使用。

 

二,、細(xì)胞收到后處理

 

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)暮棉k法,。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝,，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí),，可將瓶裝的*培養(yǎng)液收集至離心管中,，加入6ml*培養(yǎng)基，放入37℃,、5%CO2孵箱培養(yǎng),；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存,，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）

 

三,、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

 

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

 

細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

 

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