日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

細胞培養(yǎng)基成分復雜,，包括鹽類,、糖類、維生素,、氨基酸,、代謝前體、生長因子,、激素和微量元素,。對這些物質(zhì)的需求因細胞而有差異，這也導致大量的不同培養(yǎng)基配方出現(xiàn),。主要碳源物質(zhì)通常是葡萄糖,，有時也會使用半乳糖代替，這是因為半乳糖的代謝速度較慢,。氨基酸（尤其是 L - 谷氨酰胺）和丙酮酸鹽也可作為碳源,。

 

除了營養(yǎng)成分，培養(yǎng)基也會幫助維持培養(yǎng)體系的 pH 和滲透壓,。pH 的維持依靠一種或多種緩沖液體系,，常見的包括 CO2/NaHCO3、磷酸鹽和 HEPES 等,，血清也可以作為*培養(yǎng)基的緩沖液,。

1、碳酸氫鈉和 CO2

細胞的存活和生長,，需要 CO2 同時也會產(chǎn)生少量 CO2。在培養(yǎng)基中加入 CO2 可以與 HCO3^?形成平衡,，所以很多種類的培養(yǎng)基會通過 CO2/HCO3^? 體系平衡 pH,。CO2 直接溶解在培養(yǎng)基中并形成 H2CO3,。隨著細胞代謝并產(chǎn)生更多的 CO2，培養(yǎng)基 pH 下降并導致下面的化學平衡向右移動：

 

H2O + CO2←→ H2CO3 ←→H+ + HCO3^? 

 

理想的 pH 范圍是 7.2～7.4,，可以通過補充 NaHCO3 和調(diào)節(jié)上層空氣中的 CO2 水平來維持,，化學過程如下：

 

H2O+CO2+NaHCO3←→H⁺+ Na⁺ + 2HCO3^?  

 

組織培養(yǎng)時，細胞可能在開放體系中（培養(yǎng)基上層空氣和培養(yǎng)箱中空氣可以自由交換）生長,，也可能在封閉體系中（培養(yǎng)基上層空氣和培養(yǎng)箱中空氣相互隔離）生長,。培養(yǎng)基中的緩沖體系需要與這些培養(yǎng)方式匹配，否則細胞狀態(tài)會由于代謝壓力而變差,。

 

在開放體系中培養(yǎng)細胞時,，可通過控制空氣濕度（可以減少培養(yǎng)基蒸發(fā)）和 CO2 的調(diào)節(jié)方式（如果培養(yǎng)基含 NaHCO3）來維持 pH。在開放體系中,，需要含更高 NaHCO3 濃度的 Earle's 平衡鹽溶液,，并且由培養(yǎng)箱維持 5～10% CO2。通常,，1.2～2.2g/L NaHCO3 配合 5% CO2,，3.7 g/L NaHCO3 配合 10% CO2。的計量因培養(yǎng)基配方而不同,。

 

除了 Leibovitz's L-15 (ATCC No.30-2008),，ATCC 所有培養(yǎng)基都要匹配 5% CO2。絕大多數(shù) ATCC 培養(yǎng)基含 1.5g/L NaHCO3 以及額外的丙酮酸鈉,。而 Gibco Hyclone 很多品牌的培養(yǎng)基里都含有 3.7 g/L NaHCO3,，因此應(yīng)該匹配 10% CO2。

2,、HEPES

 

HEPES 和其他有機緩沖液可以有效調(diào)節(jié)培養(yǎng)基 pH,，適用于多種細胞系。實際上,，某些標準培養(yǎng)基配方包含 HEPES,。但是，HEPES 可能會有毒性,，尤其是對某些已分化細胞,，所以使用前需首先評估其效果。

3,、酚紅

 

酚紅可作為培養(yǎng)基的 pH 指示劑,。酚紅在低 pH 時顯示黃色，在高 pH 時則顯示紫色,。絕大多數(shù)組織培養(yǎng)時,，pH 為 7.4，應(yīng)顯示為微紅色,。 

4,、L - 谷氨酸鈉

L - 谷氨酰胺是所有哺乳動物細胞和昆蟲細胞的必需氨基酸,。與其它氨基酸相比，L - 谷氨酰胺在液體培養(yǎng)基中更不穩(wěn)定,。因此,，為了延長保質(zhì)期，商品化的液體培養(yǎng)基中經(jīng)常不添加 L - 谷氨酰胺,。這種情況下,，使用前要先無菌加入 L - 谷氨酰胺。由于在干燥狀態(tài)下比較穩(wěn)定,，所以絕大多數(shù)干粉培養(yǎng)基中都已預(yù)添加 L - 谷氨酰胺,。

5、非必須氨基酸

 

所有培養(yǎng)基配方包含十種必需氨基酸,，同時包括半胱氨酸,、谷氨酰胺和酪氨酸。在一些培養(yǎng)基配方中包含其他非必需氨基酸 (丙氨酸,，天冬酰胺,，天冬氨酸，甘氨酸,，谷氨酸,，脯氨酸，絲氨酸),，降低了細胞的代謝負擔,，有利于細胞增殖。

 

培養(yǎng)條件的變化,，有可能改變細胞系的特性,。來自于不同廠家的培養(yǎng)基，即使名字相同或類似,，配方也略有差異,。為了保證培養(yǎng)基一致性，如果購買 ATCC 細胞,，建議使用 ATCC 原裝培養(yǎng)基,。所以，接下來告訴你一個好消息,。