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細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染方法和步驟
閱讀:12386 發(fā)布時間:2018-9-27 一,、貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,,每孔細(xì)胞數(shù)約為1×105 個,
2.第二天,,待細(xì)胞貼壁后,,換液,,
3.加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,,
4.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
5.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),,并更換為新鮮培養(yǎng)基,,
6.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細(xì)胞生長情況,,中途可以換液,,保持細(xì)胞的活性,
7.當(dāng)細(xì)胞長滿板底后,傳代至T25培養(yǎng)瓶中,。
二,、懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)約為3×105 個,,
2.第二天,,換液后加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,,
3.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),,
4.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,,
5.轉(zhuǎn)染1周后,,觀察細(xì)胞生長情況,中途可以換液,,保持細(xì)胞的活性,。