成纖維細(xì)胞（又稱(chēng)皮膚成纖維細(xì)胞）屬于由中胚層分化而來(lái)的間質(zhì)細(xì)胞。細(xì)胞來(lái)源于人正常的皮膚組織,，成纖維細(xì)胞是一種貼壁培養(yǎng)方式的細(xì)胞,，由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng)，它們已經(jīng)被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中,。
一般而言,，成纖維細(xì)胞能夠分泌I型和 III 型膠原等細(xì)胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同,。
傷口修復(fù)時(shí),，成纖維細(xì)胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可重塑基質(zhì)的表型,，同時(shí),，它們會(huì)分泌大量的透明質(zhì)酸來(lái)應(yīng)對(duì)修復(fù)時(shí)的炎癥反應(yīng)。
以下是賽百慷提供的一種人成纖維細(xì)胞的制備方式（僅供參考）：- 首先在分離成纖維細(xì)胞時(shí)要做到在無(wú)菌條件下進(jìn)行,，打開(kāi)生物安全柜紫外燈 30min 作無(wú)菌處理,。
- 將手術(shù)廢棄的皮膚組織浸泡 75% 酒精，消毒 2min,，
- 將皮膚組織置含 P/S 的 PBS 中清洗至少 3 遍,，
- 然后用眼科剪除去脂肪及結(jié)締組織等，
- 將皮膚剪成 0.5*0.5 cm 小塊,，放入 dish 中,，加 0.1% 的 dispase 溶液，封口膜封口,，4℃ 冰箱過(guò)夜消化,，
- 第二天，用鑷子將表皮與分開(kāi)（薄的那層是表皮,，厚的那層是）,，
- 將剪碎，移至離心管,，用 0.1% 膠原 Ⅰ 型酶+0.1% 膠原Ⅱ型酶+0.1% 膠原Ⅳ型酶+ 37℃ 水浴鍋中消化至少 2 h（視消化程度而定），
- 用 100 μm 網(wǎng)篩過(guò)濾,，
- 取濾液,，300 g，離心5 min,，
- 用*培養(yǎng)基重懸沉淀,，
- 鋪瓶，
- 隔天換液,。
以上是皮膚成纖維細(xì)胞分離培養(yǎng)的一種方式,，不同的技術(shù)人員分離培養(yǎng)的方法也不同，使用的試劑比例也不盡相同,，皮膚成纖維細(xì)胞特異性纖維連接蛋白或波形蛋白表達(dá)檢測(cè),，采用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)。細(xì)胞純度可高達(dá)于 90%,，所有的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。 |
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