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石蠟切片免疫組化實驗步驟1.  石蠟切片置于67℃烘箱中,，烘片2小時,，脫蠟至水，用pH7.4的PBS沖洗三次,，每次3分鐘（3×3’）,。

 

2.  取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液，加入微波盒中,，微波加熱至沸騰,，將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中,，中檔微波處理10分鐘,，取出微波盒流水自然泠卻，從緩沖液中取出玻片,，先用蒸餾水沖洗兩次,，之后用PBS沖洗2×3’。（注：不是所有的抗體都需要微波修復的,，視具體情況而定）

 

3.  每張切片加1滴3%H2O2,，室溫下孵育10分鐘，以阻斷內源性過氧化物酶的活性,。PBS沖洗3×3’,。

 

4.  除去PBS液，每張切片加1滴相應的抗體（相應稀釋倍數(shù)）,，室溫下孵育2小時,。

 

5.  PBS沖洗3×5’。除去PBS液,，每張切片加1滴聚合物增強劑,，室溫下孵育20分鐘。PBS沖洗3×3’,。

 

6.  除去PBS液,，每張切片加1滴酶標抗鼠/兔聚合物,，室溫下孵育30分鐘。PBS沖洗3×5’,。

 

7.  除去PBS液,，每張切片加1滴新鮮配制的DAB液（二氨基聯(lián)苯胺），顯微鏡下觀察5分鐘,。

 

8.  蘇木素復染，0.1%HCl分化,，自來水沖洗,，藍化，切片經梯度酒精脫水干燥,，二甲苯透明,，中性樹膠封固，晾干后觀察,。

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石蠟切片免疫組化實驗步驟