一、固相萃取的基本原理和方法:
固相萃取技術(shù)基于液-固相色譜理論,,采用選擇性吸附,、選擇性洗脫的方式對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離,、純化,,是一種包括液相和固相的物理萃取過(guò)程;也可以將其近似的看作一種簡(jiǎn)單的色譜過(guò)程,。
固相萃取是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理,。較常用的方法是使液體樣品通過(guò)一吸附劑,保留其中被測(cè)物質(zhì),再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì),,然后用少量良溶劑洗脫被測(cè)物質(zhì),,從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì),,而讓被測(cè)物質(zhì)流出,;或同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測(cè)物質(zhì),再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測(cè)物質(zhì),。
二,、固相萃取方法的優(yōu)點(diǎn):
優(yōu)點(diǎn):無(wú)需特殊裝置和材料
優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,無(wú)需特殊裝置
優(yōu)點(diǎn):
1.集樣品富集及凈化與一身,,提高檢測(cè)靈敏度的方法
2.比液液萃取更快,,節(jié)省溶劑
3.可自動(dòng)化批量處理
4.重現(xiàn)性好
三、固相萃取裝置及基本操作步驟:
1.固相萃取柱
(1)SPE小柱
關(guān)于固相萃取小柱:
a.常見(jiàn)的固相萃取柱分為三部分:醫(yī)用聚丙烯柱管,,多孔聚丙烯篩板(20μm)和填料(多為40-60μm,,80-100μm)
b.常見(jiàn)規(guī)格:100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml為例,,其中100mg
為填料的質(zhì)量,,1ml是空柱管的體積。
c.一次性使用:為避免交叉污染,,保證檢測(cè)可靠性,,SPE小柱通常是一次性使用的。
2.固相萃取裝置
(1)真空SPE裝置組成:玻璃缸,,真空壓力表,,真空泵,真空緩沖瓶,,收集管架,,小柱連接頭,大體積取樣器,,12位或24位防交叉污染裝置,。
a、標(biāo)配StopCock閥,,控制流速
b,、試管架高度可調(diào),滿足不同體積需要
c,、壓力表放空閥側(cè)面設(shè)計(jì),,使用方便
d、設(shè)計(jì)緊湊,、經(jīng)久耐用,、性價(jià)比高
3.基本操作步驟
針對(duì)填料保留機(jī)理的不同(填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)),,操作稍有不同。
1)填料保留目標(biāo)化合物
固相萃取操作一般有四步:
活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造yi定的溶劑環(huán)境,。
上樣——將樣品用yi定的溶劑溶解,,轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。
淋洗——程度除去干擾物,。
洗脫——用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集,。
2)填料保留雜質(zhì)
固相萃取儀操作一般有三步:
活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造yi定的溶劑環(huán)境。
上樣——將樣品轉(zhuǎn)移入柱,,此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出,,雜質(zhì)被保留在柱上。故此步驟要開(kāi)始收集,。
洗脫——用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集。合并收集液,。
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