將供試品注入微生物限度培養(yǎng)器內(nèi),，通過(guò)檢驗(yàn)儀自帶內(nèi)置進(jìn)口隔膜液泵負(fù)壓抽濾,，將供試品中微生物截留在濾膜上，用取膜器取出濾膜,，轉(zhuǎn)移至配置好的固體培養(yǎng)基上,，菌面朝上，平貼,。蓋上蓋子形成封閉的培養(yǎng)盒,，置于相應(yīng)的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)并計(jì)數(shù)。
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000 級(jí)下的局部潔凈度100 級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,，防止再污染。單向流空氣區(qū)域,、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子,、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。
1.實(shí)驗(yàn)前
1.1實(shí)驗(yàn)用工器具的準(zhǔn)備：檢測(cè)過(guò)程中用到的玻璃平皿需滅菌(濕熱滅菌121℃,、30分鐘或干熱滅菌160℃,、2小時(shí))備用；剪刀、鑷子等需先用紗布包好,，外包牛皮紙包好扎緊,，滅菌(濕熱滅菌121℃、30分鐘),；移液管,、槍頭等用報(bào)紙包好扎緊，滅菌(濕熱滅菌121℃,、30分鐘),。
1.2培養(yǎng)基及稀釋液的準(zhǔn)備：根據(jù)檢驗(yàn)樣品，計(jì)算出培養(yǎng)基與稀釋液的用量,，按照比例進(jìn)行配置,，包好，根據(jù)培養(yǎng)基與稀釋液的屬性,，進(jìn)行濕熱滅菌,，備用。
1.3潔凈服準(zhǔn)備：將當(dāng)天所用潔凈服放入滅菌鍋中進(jìn)行滅菌,，備用,；或使用已滅菌且在有效期內(nèi)的潔凈服。
1.4確保實(shí)驗(yàn)潔凈區(qū)域通風(fēng),，觀察潔凈室各個(gè)規(guī)定區(qū)域的壓差是否符合規(guī)定,，若不符合，及時(shí)通知設(shè)備部門(mén),，進(jìn)行調(diào)整,。
2.實(shí)驗(yàn)中
2.1將實(shí)驗(yàn)所需的平皿、培養(yǎng)基,、工器具,、稀釋液放入傳遞窗中，打開(kāi)紫外燈,，照射30分鐘,。
2.2進(jìn)入潔凈區(qū)域，手清潔消毒,，換上潔凈服,，進(jìn)入檢查室，打開(kāi)潔凈工作臺(tái)通風(fēng),，用消毒劑擦拭臺(tái)面,，取出傳遞窗中照射后物品，按照使用先后順序置于潔凈工作臺(tái)上,，擺好后紫外照射30分鐘,，人員退出檢查室,，紫外照射結(jié)束后，繼續(xù)通風(fēng)30分鐘,，檢測(cè)人員方可進(jìn)入檢查室進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。
2.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需點(diǎn)酒精燈，拆開(kāi)滅菌后包好的培養(yǎng)基外層,，在近火焰處輕微灼燒培養(yǎng)基瓶口,，打開(kāi)瓶蓋，傾倒培養(yǎng)基至滅菌后的平板中,，待冷凝后使用,。
3.實(shí)驗(yàn)后
3.1清潔及衛(wèi)生：做完實(shí)驗(yàn)后，用消毒劑對(duì)操作臺(tái)面進(jìn)行擦拭消毒,，待實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)物和實(shí)驗(yàn)廢棄物傳出潔凈區(qū)域后,，使用純化水對(duì)地面進(jìn)行清潔。
3.2培養(yǎng)及結(jié)果觀察：需氧菌平板應(yīng)在30-35℃下,，培養(yǎng)3-5天,，霉菌與酵母菌平板應(yīng)在20-25℃下，培養(yǎng)5-7天,，空白與陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng),。
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