將供試品注入微生物限度培養(yǎng)器內(nèi),，通過檢驗儀自帶內(nèi)置進(jìn)口隔膜液泵負(fù)壓抽濾，將供試品中微生物截留在濾膜上,，用取膜器取出濾膜,，轉(zhuǎn)移至配置好的固體培養(yǎng)基上，菌面朝上,，平貼,。蓋上蓋子形成封閉的培養(yǎng)盒，置于相應(yīng)的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)并計數(shù)。
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,。檢驗全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,，防止再污染。單向流空氣區(qū)域,、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子,、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗證。
1.實驗前
1.1實驗用工器具的準(zhǔn)備：檢測過程中用到的玻璃平皿需滅菌(濕熱滅菌121℃,、30分鐘或干熱滅菌160℃,、2小時)備用；剪刀,、鑷子等需先用紗布包好,，外包牛皮紙包好扎緊，滅菌(濕熱滅菌121℃,、30分鐘),；移液管、槍頭等用報紙包好扎緊,，滅菌(濕熱滅菌121℃,、30分鐘)。
1.2培養(yǎng)基及稀釋液的準(zhǔn)備：根據(jù)檢驗樣品,，計算出培養(yǎng)基與稀釋液的用量,，按照比例進(jìn)行配置，包好,，根據(jù)培養(yǎng)基與稀釋液的屬性,，進(jìn)行濕熱滅菌，備用,。
1.3潔凈服準(zhǔn)備：將當(dāng)天所用潔凈服放入滅菌鍋中進(jìn)行滅菌,，備用；或使用已滅菌且在有效期內(nèi)的潔凈服,。
1.4確保實驗潔凈區(qū)域通風(fēng),，觀察潔凈室各個規(guī)定區(qū)域的壓差是否符合規(guī)定，若不符合,，及時通知設(shè)備部門,，進(jìn)行調(diào)整。
2.實驗中
2.1將實驗所需的平皿,、培養(yǎng)基,、工器具、稀釋液放入傳遞窗中,，打開紫外燈,，照射30分鐘。
2.2進(jìn)入潔凈區(qū)域，手清潔消毒,，換上潔凈服,，進(jìn)入檢查室，打開潔凈工作臺通風(fēng),，用消毒劑擦拭臺面,，取出傳遞窗中照射后物品，按照使用先后順序置于潔凈工作臺上,，擺好后紫外照射30分鐘,，人員退出檢查室，紫外照射結(jié)束后,，繼續(xù)通風(fēng)30分鐘,，檢測人員方可進(jìn)入檢查室進(jìn)行實驗。
2.3實驗過程中需點酒精燈,，拆開滅菌后包好的培養(yǎng)基外層,，在近火焰處輕微灼燒培養(yǎng)基瓶口，打開瓶蓋,，傾倒培養(yǎng)基至滅菌后的平板中,，待冷凝后使用。
3.實驗后
3.1清潔及衛(wèi)生：做完實驗后,，用消毒劑對操作臺面進(jìn)行擦拭消毒,，待實驗培養(yǎng)物和實驗廢棄物傳出潔凈區(qū)域后，使用純化水對地面進(jìn)行清潔,。
3.2培養(yǎng)及結(jié)果觀察：需氧菌平板應(yīng)在30-35℃下,，培養(yǎng)3-5天，霉菌與酵母菌平板應(yīng)在20-25℃下,，培養(yǎng)5-7天,，空白與陰性對照應(yīng)無菌生長。
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