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4.3.1 取出一次性培養(yǎng)器先檢查包裝是否無損，在無菌室內(nèi)打開無菌包裝,。 
4.3.2 將一次性培養(yǎng)器逐個(gè)插放在不銹鋼排液槽上,。 
4.3.3 將一次性培養(yǎng)器的彈性軟管裝入集菌儀的蠕動(dòng)泵頭，要求定位準(zhǔn)確,，軟管走勢(shì)順暢,。 
4.3.4 用中間的針孔插到樣品瓶里，然后用尾端針孔插到稀釋液里,，開機(jī),，將稀釋液倒置，把液體打入樣品瓶中,，樣品瓶中液體加滿后,，放下稀釋液,，再倒置樣品瓶，使樣品通過培養(yǎng)器進(jìn)行集菌,。 
4.3.5 完成集菌后，開啟已滅菌好的培養(yǎng)基瓶,，將前端針頭插入培養(yǎng)基中,，稀釋液瓶中針孔不要拔出。 
4.3.6 摘下一次性培養(yǎng)器頂部空氣濾器開口的膠塞,，套在一次性培養(yǎng)器的底口上,， 
4.3.7 用夾子夾閉與一次性培養(yǎng)器連接部的軟管，留出5-6cm軟管,，剪除其余部分,，并將開口端插在空氣濾器的開口上。 
4.3.8 分別按照規(guī)定時(shí)間培養(yǎng),。 
4.3.9 觀察培養(yǎng)情況,，若需取樣分離培養(yǎng)，可將軟管消毒,，用無菌注射器插入軟管抽取所需,；量做進(jìn)一步檢查 。 
4.4 微生物限度檢測(cè)操作過程 
4.4.1 取濾膜（直徑50mm）N張,，浸泡在純化水里約5分鐘,。 
4.4.2 用鑷子取出濾膜，平帖在不銹鋼網(wǎng)面片放入不銹鋼底座里,，放入墊片和0型圈,，將螺蓋和杯體蓋緊組裝成一套完整的全封閉過濾培養(yǎng)器。 
4.4.3 滅菌,，用牛皮紙將組裝好的培養(yǎng)器包好,，放入高壓濕熱滅菌鍋里，121℃,0.1MPa進(jìn)行滅菌,。 
4.4.4 取滅菌好的培養(yǎng)器至微生物限度檢定室,，進(jìn)行集菌過濾。 
4.4.5 打開配制好的固體培養(yǎng)基,，將集菌好的濾膜平帖在培養(yǎng)基上（濾膜上不可以有氣泡產(chǎn)生）,。 
4.4.6 按照規(guī)定進(jìn)行培養(yǎng)。 
4.5 注意事項(xiàng) 
4.5.1 在集菌儀泵頭合上之前（需扣緊蠕動(dòng)泵東快）,，嚴(yán)禁啟動(dòng)開關(guān),，否則將可能倒置手部受傷。 
4.5.2 若無菌室采用化學(xué)消毒劑消毒時(shí),，應(yīng)將儀器移至封閉罩內(nèi),，或搬出無菌室,，以免損壞電子不見和儀器表面。 
4.5.3 應(yīng)保持取樣針上的過濾膜干燥,，氣流暢通,，正常進(jìn)液。方法是在取樣針插入瓶裝流體樣品時(shí),，應(yīng)先開機(jī),，然后倒置容器瓶。 
4.5.4 若敬業(yè)管內(nèi)出現(xiàn)過多氣泡,，應(yīng)將泵速降低,，并檢查進(jìn)氣濾膜是否被浸泡，若不能進(jìn)液,，則檢查進(jìn)液針是否暢通,。