厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的實(shí)驗(yàn)裝置,。它能提供嚴(yán)格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個(gè)系統(tǒng)化、科學(xué)化的工作區(qū)域,。在厭氧培養(yǎng)箱內(nèi)操作培養(yǎng),,可以培養(yǎng)難生長的厭氧生物,又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時(shí)接觸氧而死亡的危險(xiǎn)性,,因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具,。本裝置也是一物多用的良好儀器,如改變操作方式,,為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件,,可采用內(nèi)置.含氧檢測儀(用于自配),通過檢測及需要并配于操作面板的流量調(diào)節(jié)裝置,。輸入微需氧菌的規(guī)定含氧量,,可滿足微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。
1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈,、溫度變化較小的地方,;
2.開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,,掌握正確使用方法,;
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入;
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持10小時(shí)厭氧狀態(tài)(超過10小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理),;
5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象,;
6.調(diào)換氣瓶時(shí),注意要扎緊氣管,,避免流入含氧氣體,;
真空泵按要求使用,定期檢查加油,。
一,、操作室厭氧環(huán)境形成
1 按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無毒塑料袋,。
2 通電源開照明燈,,開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度,。
3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉),。
4 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗(yàn),。
5 操作室內(nèi)DI一次置換(氮?dú)庵脫Q):
(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,,另一頭插入塑料袋。
(2)接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,,打開氮?dú)饪刂崎y,,使二只塑料袋充足氮?dú)?,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。
(4)把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi),,至全部放出。
6 操作室DI二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一 次充氮過程,,并注意隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣,。
7 操作室DI三次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)
(1)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進(jìn)氣,充氣時(shí)要隨時(shí)腳踏開關(guān)開閉排氣,。
(2)混合氣充滿塑料袋后,,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經(jīng)過流量計(jì)輸入操作并調(diào)整流量計(jì),,流量為每分鐘10毫升左右,。
(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過三次換氣后,,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。
8 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,,一 小時(shí)后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變況,,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
9 開紫外線滅菌燈,,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。滅菌時(shí)間自定,。
二,、菌種的置入和培養(yǎng)
1 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。
2 打開取樣室外門,,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門,。
3 取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮?dú)忾y門進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作。
4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù),。
5 取樣室內(nèi)外門開啟,,關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)檢驗(yàn)及幫助操作。
6 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:
(1)每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,,正常情況下使用,。如不正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,,使補(bǔ)進(jìn)的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
(3)連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一 天,,更換一 次除氧劑和干燥劑,。
7 接種棒滅菌器的應(yīng)用:
(1)隨時(shí)用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌(接種棒)
(2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟,。
8 操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制,。
9 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,,使輸出壓力為0.1Mpa左右,。
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