IgA檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫測定法（ELISA）,，用于定量貓血漿和血清樣本中免疫球蛋白A（IgA）的測定,。用于研究用途只有,。不用于診斷程序,。

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貓IgA ELISA試劑盒檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示,。在這種測定中,，樣本中的IgA與吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgA抗體發(fā)生反應。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后,，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗IgA抗體,。這些酶標記的抗體與之前結(jié)合的IgA形成復合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后,，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定免疫吸附劑上結(jié)合的酶,。結(jié)合酶的量與測試樣本中IgA的濃度直接相關(guān)；因此,，450納米處的吸光度是測試樣本中IgA濃度的量度,。測試樣本中IgA的量可以從標準曲線中插值得到，并根據(jù)樣本稀釋進行校正,。

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險物,。處理和處置時應遵循通用預防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝塊,、嚴重溶血,、脂血或樣本完整性存疑，請做好記錄并謹慎解釋結(jié)果,。

以下列出的樣本收集和儲存條件僅供參考,。樣本穩(wěn)定性未經(jīng)評估。

血清樣本：應通過靜脈穿刺收集血液,。血液凝固后通過離心分離血清,。取出血清后立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融循環(huán),。

血漿樣本：應將血液收集到含有抗凝劑的容器中,，然后進行離心。立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C,。避免反復凍融循環(huán),。

已知干擾物質(zhì)：疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度時會抑制酶反應。

樣本稀釋

測定要求每個測試樣本在使用前進行稀釋,。每次進行測定時,，所有樣本應進行雙重測定。推薦的稀釋比例僅供參考,。

稀釋應基于未知樣本的預期濃度,，以使稀釋后的樣本落在標準曲線的動態(tài)范圍內(nèi),。如果不確定樣本值，在運行整個板之前,，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋測定,。

血清和血漿樣本 - 建議起始稀釋比例為1:20,000,。要制備1:20,000的y本稀釋液,，將5微升樣本轉(zhuǎn)移到495微升1X稀釋液中。這得到1:100的稀釋,。接下來,，將1:100的樣本通過將5微升轉(zhuǎn)移到995微升1X稀釋液中進行稀釋。這得到1:20,000的稀釋,。每個階段都要c底混合,。

試劑準備：

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液是5倍濃縮液,，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液,，4份dH2O）稀釋1:5。

洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液,，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液,，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮液在儲存溫度低時可能會形成晶體,。稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體,。

酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個微孔板測試條添加10微升酶-抗體結(jié)合物到990微升1X稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液量,。使用前立即稀釋并避光保存,。均勻混合，但要輕柔,。避免起泡,。

預涂覆ELISA微孔板 - 按提供狀態(tài)使用。打開箔袋,，從袋中取出板,。取出在測定中不會使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封,，連同干燥劑一起,。

貓IgA校準液 - 根據(jù)批次特定的分析證明書進行準備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣,，可測樣品來源包括人,、大/小鼠、豚鼠,、兔,、豬,、羊、狗,、猴等,，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝,、心血管疾病和氧化應激,、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學,、甲狀腺功能、腸胃病學,、免疫學,、生殖激素、抗體和抗原,、分子診斷等多個研究領(lǐng)域,，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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