CeliCheck（組織轉(zhuǎn)g氨酰胺酶IgA/IgG）ELISA是一種固相酶免疫測(cè)定法，用于定量和定性檢測(cè)人血清中針對(duì)組織轉(zhuǎn)g氨酰胺蛋白酶（tTG）新表位的IgA和IgG抗體,。采用與醇溶蛋白特異性肽交聯(lián)的人重組tTG的檢測(cè)顯示了tTG的新表位,，這確保了檢測(cè)的分析靈敏度和特異性顯著提高,。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷(xiāo)產(chǎn)品CeliCheck（組織轉(zhuǎn)g氨酰胺酶IgA/IgG）ELISA,。產(chǎn)品僅用于科研,，不可用于臨床診斷。

CeliCheck（組織轉(zhuǎn)g氨酰胺酶IgA/IgG）ELISA檢測(cè)原理：

將1:101稀釋的血清樣本在涂有特異性抗原的微孔板中孵育,。樣本中的抗體與抗原結(jié)合,。在以下步驟中洗掉未結(jié)合的部分。然后,，將與辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的抗人免y球蛋白孵育,，并與微孔板中樣品的抗原-抗體復(fù)合物反應(yīng),。在接下來(lái)的步驟中洗掉未結(jié)合的共軛物。添加TMB底物會(huì)產(chǎn)生無(wú)酶比色（藍(lán)色）反應(yīng),，該反應(yīng)被稀酸阻止（顏色變?yōu)辄S色）,。發(fā)色團(tuán)顏色形成的強(qiáng)度是結(jié)合到抗原-抗體復(fù)合物上的結(jié)合物的量的函數(shù)，這與樣品中相應(yīng)抗體的初始濃度成正比,。

測(cè)定程序

1 開(kāi)始前的準(zhǔn)備

試劑準(zhǔn)備：

稀釋濃縮試劑：

- 將濃縮樣本緩沖液按1:5的比例用蒸餾水稀釋?zhuān)ɡ?0毫升加80毫升）,。

- 將濃縮洗滌緩沖液按1:50的比例用蒸餾水稀釋?zhuān)ɡ?0毫升加980毫升）。

為避免錯(cuò)誤,，建議標(biāo)記不同校準(zhǔn)液的瓶蓋,。

樣本準(zhǔn)備：

將血清樣本按1:101的比例用樣本緩沖液（1x）稀釋?zhuān)?000微升樣本緩沖液（1x）+ 10微升血清。

混合均勻,！

洗滌：

- 每8個(gè)孔準(zhǔn)備20毫升稀釋洗滌緩沖液（1x）,，或96孔則準(zhǔn)備200毫升，例如4毫升濃縮液加196毫升蒸餾水,。

自動(dòng)洗滌：

- 考慮設(shè)置儀器和機(jī)器人移液管死體積所需的額外體積。

手動(dòng)洗滌：

- 將孔中的液體倒置板子倒掉,。將微孔板框架孔朝下在干凈的吸水紙上用力敲擊,。

- 向每個(gè)孔中移液300微升稀釋洗滌緩沖液，等待20秒,。再次重復(fù)整個(gè)程序兩次,。

微孔板：

- 計(jì)算測(cè)試所需的孔數(shù)。從框架中移除未使用的孔,，放回提供的塑料袋中,，與干燥劑一起密封存放（2-8°C/35-46°F）。

使用通用指南

如果產(chǎn)品信息（包括標(biāo)簽）有缺陷或錯(cuò)誤,，請(qǐng)聯(lián)系A(chǔ)LPCO,。不要混合或替換不同批號(hào)的對(duì)照品、校準(zhǔn)液,、結(jié)合物或微孔板,。這可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果變化。使用前讓所有組分達(dá)到室溫（20-32°C/68-89.6°F）,，混合均勻,，并遵循推薦的孵育方案以獲得最佳測(cè)試性能。孵育：建議在30°C/86°F下進(jìn)行自動(dòng)化系統(tǒng)的測(cè)試,。不要將組分暴露在高于37°C/98.6°F的溫度下,。始終使用全新的移液管頭吸取底物溶液。保護(hù)這種試劑不受光線照射,。永遠(yuǎn)不要使用與其他試劑一起使用過(guò)的移液管頭吸取結(jié)合物,。

樣本收集,、處理和儲(chǔ)存

優(yōu)先使用新鮮收集的血清樣本。采血必須遵循國(guó)家要求,。不要使用溶血,、脂血、黃疸或細(xì)菌污染的樣本,。含有顆粒的血清應(yīng)通過(guò)低速離心（<1000 xg）清除,。血液樣本應(yīng)收集在干凈、干燥,、空的試管中,。分離后，血清樣本應(yīng)在最初8小時(shí)內(nèi)使用,，或緊閉存放在2-8°C/35-46°F下最多48小時(shí),，或在-20°C/-4°F下冷凍以保存更長(zhǎng)時(shí)間。

文獻(xiàn)參考：

1. Dietrich W, Ehnis T, Bauer M, Donner P, Volta U, Riecken EO, Schuppan D (1997).Identification of tissue transglutaminase as the autoantigen of celiac disease. Nat Med1997; 3: 797-801.

2. Dietrich W, Laag E, Sch?pper H, Volta U, Ferguson A, Gillett H, Riecken EO, SchuppanD (1998). Autoantibodies to tissue transglutaminase as predictors of celiac disease.Gastroenterology 1998; 115: 1317-1321.

3. M?ki M, Collin P (1997). Coeliac disease. Lancet 1997 349: 1755-1759.4. Shan L, Molberg O, Parrot I, Hausch F, Filiz F, Gray GM, Sollid LM, Khosla C (2002).Structural basis for gluten intolerance in Celiac Sprue. Science 297: 2275-2279.

ALPCO產(chǎn)品種類(lèi)多樣,，可測(cè)樣品來(lái)源包括人,、大/小鼠、豚鼠,、兔,、豬、羊,、狗,、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué),、骨代謝,、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、糖尿病和肥胖癥,、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能,、腸胃病學(xué),、免疫學(xué)、生殖激素,、抗體和抗原,、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng),。

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