游離甲狀腺素ELISA是一種酶免疫測定法，用于定量測定人血清中的游離甲狀腺素（fT4）,。僅供研究使用,。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理,，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品fT4 (FreeThyroxine) EIA試劑盒,，(96孔)。產品僅用于科研,，不可用于臨床診斷,。

fT4 (FreeThyroxine) EIA試劑盒,，(96孔)檢測原理：

游離甲狀腺素ELISA是一種固相競爭酶免疫測定法,。將血清樣本、標準品和甲狀腺素酶偶聯(lián)工作試劑加入涂有單克隆甲狀腺素抗體的孔中,。樣品中的游離甲狀腺素和甲狀腺素標記的結合物競爭抗體上的可用結合位點,。在室溫下孵育60分鐘后，用水洗滌孔以去除未結合的甲狀腺素結合物,。然后加入H2O2/TMB溶液并孵育20分鐘,，導致藍色的發(fā)展。加入3N HCl停止顯色,，在450nm處用分光光度法測量吸光度,。形成的顏色強度與存在的酶的量成正比，與樣品中未標記的游離甲狀腺素的量成反比,。通過參考一系列以相同方式測定的游離甲狀腺素標準品,，對未知樣品中游離甲狀腺素的濃度進行定量。

試劑

試劑盒提供的材料：

- 抗體涂層微孔板,，96孔 - 涂有抗T4抗體

- fT4-酶結合物試劑,，即用型，1瓶，10.5 mL - 含有與辣根過氧化物酶結合的T4抗體和防腐劑

- 自由T4參考標準套裝 - 六瓶血清參考fT4,，近似*濃度為0, 0.4, 1.1, 2.2, 4.1和8.0 ng/dL,，已添加防腐劑；液體,，即用型,，每瓶1 mL

  *具體水平在批次特定的標簽上給出

  *對于國際單位制，1ng/dL x 12.9 = pmol/L

- 顯色試劑A,，1瓶,，13 mL - 含有醋酸緩沖液中的過氧化氫

- 顯色試劑B，1瓶,，13 mL - 含有在緩沖溶液中穩(wěn)定的3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺（TMB）

- 停止溶液（3N鹽酸）,，1瓶，10 mL - 含有稀釋的鹽酸

需要但不提供的試劑：

- 能夠提供50 ?L體積,，精度優(yōu)于1.5%的移液管

- 能夠重復提供50 ?L和200 ?L體積,，精度優(yōu)于1.5%的分配器

- 具有450 nm波長吸收能力的微孔板讀取器

- 用于混合顯色試劑A與顯色試劑B的試管

- 用于洗板后吸干的吸水紙

- 計時器

- 質量控制材料

試劑盒和儀器的儲存

未開封的試劑盒在收到后應存放在2-8°C，并應將微孔板保存在帶有干燥劑的密封袋中,，以盡量減少潮濕空氣的接觸,。按照上述描述儲存的開封試劑盒，直到顯示的有效期前都保持穩(wěn)定,。在450 nm波長下,，具有10 nm或更小帶寬和0 - 2.0 OD或更大光密度范圍的微孔板讀取器適用于吸收測量。

標準曲線示例：

程序的局限性：

1. 當對使用說明書有完整理解并遵守良好實驗室規(guī)范時,，將獲得可靠和可重復的結果,。

2. 洗滌程序至關重要。洗滌不充分會導致精度差和錯誤的高吸光度讀數(shù),。

3. 顯示嚴重脂血,、嚴重溶血或渾濁的血清樣本不應使用此測試。

4. 如果設備未能正常工作,，請聯(lián)系ALPCO,。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人,、大/小鼠,、豚鼠、兔,、豬,、羊、狗,、猴等,，涉及神經(jīng)生物學,、骨代謝、心血管疾病和氧化應激,、細胞因子與信號轉導,、糖尿病和肥胖癥、內分泌學,、甲狀腺功能、腸胃病學,、免疫學,、生殖激素、抗體和抗原,、分子診斷等多個研究領域,，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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