脂質(zhì)包被珠被設(shè)計用于蛋白質(zhì)下拉實驗。用于檢測純化蛋白質(zhì),、細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的脂質(zhì)結(jié)合，或放射性標(biāo)記的體外翻譯產(chǎn)物的結(jié)合,。

鞘磷脂珠由瓊脂糖組成,，每1mL珠含有10納摩爾的結(jié)合鞘磷脂，足以進(jìn)行幾次蛋白質(zhì)結(jié)合實驗,。每1mL訂單包括少量對照珠,。更多數(shù)量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech-d家代理,，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech銷售產(chǎn)品 Sphingomyelin 瓊脂糖珠,。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷,。

鞘磷脂是一種重要的生物脂質(zhì),，廣泛存在于細(xì)胞膜中，參與多種細(xì)胞生理過程,。瓊脂糖珠是一種常用于分子生物學(xué)實驗的工具,，用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)的分離和純化,。Sphingomyelin 瓊脂糖珠通過將鞘磷脂分子固定在瓊脂糖珠表面來制備,。這種固定可以是通過共價鍵或非共價相互作用實現(xiàn)的。制備好的珠粒具有高度的特異性和親和力,，能夠高效地從復(fù)雜樣品中捕獲鞘磷脂分子,。

脂質(zhì)珠TM測定注意事項：

脂質(zhì)包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規(guī)格，以1X PBS緩沖液中的50%漿液形式提供,。

訂購1 mL的產(chǎn)品會附帶200 µL的對照珠,。對照珠也可單獨購買，建議使用它們進(jìn)行分析,。

儲存在2-8°C,。產(chǎn)品對溫度和光線敏感，請勿冷凍,。

以1,000 x g或更低的速度離心珠。不要高速離心珠,，因為這可能會壓碎珠,。

每1 mL珠中有總計10毫摩爾的結(jié)合脂質(zhì)。

珠的直徑范圍在45-165微米之間,。

對每種蛋白質(zhì)使用50-100 µL的50%漿液脂質(zhì)包被珠和對照珠,。

了解陽性對照蛋白列表,。

脂質(zhì)珠^TM - 蛋白質(zhì)拉下協(xié)議：

我們提供以下協(xié)議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學(xué)文獻(xiàn)并進(jìn)行優(yōu)化實驗,，以確定對其感興趣的蛋白質(zhì)最有利的條件,。

充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 µL的50%珠漿液轉(zhuǎn)移到0.5-1.5 mL的管中,。

以1,000 x g或更低的速度離心珠以沉淀,。小心移除上清液，避免丟失珠,。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠,。輕輕混合，孵育1-2分鐘,。重復(fù)洗滌步驟兩次,。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質(zhì)的結(jié)合緩沖液中重新懸浮,。 a. 對于純化的蛋白質(zhì),，使用1-10 µg的蛋白質(zhì)，用足夠的結(jié)合緩沖液稀釋形成50%脂質(zhì)珠漿液,。 b. 對于細(xì)胞裂解物,、提取物、亞細(xì)胞組分：使用大約1 mg的總蛋白質(zhì)對1 mL結(jié)合緩沖液,。將整個1 mL準(zhǔn)備好的樣品加入到您洗滌過的珠中,。

將蛋白質(zhì)-珠溶液孵育1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進(jìn)行,，取決于您蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,。需要連續(xù)運動以保持珠懸浮。

沉淀珠并小心移除上清液,。如果需要,，上清液可以用來監(jiān)測未結(jié)合的蛋白質(zhì)。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠,。輕輕混合,，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟五次,。如果您選擇在結(jié)合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA）,，請確保在進(jìn)入下一步之前將其c底洗出。

在最后一次洗滌后,，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì),。

加熱后，沉淀珠并移除上清液,。將上清液儲存在4°C下,，直到分析,。丟棄珠。

蛋白質(zhì)可以通過SDS-PAGE分離,，并通過凝膠的Coomassie藍(lán)染色,、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和免疫印跡檢測感興趣的蛋白質(zhì)，或進(jìn)行自顯影,。

文獻(xiàn)參考：

1) Nair, S., et al. (2016). “Clonal Immunoglobulin against Lysolipids in the Origin of Myeloma." New England Journal of Medicine 374(6): 555-561.

Biogradetech成立于2015年,，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家,，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線,，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì),、抗體,、酶、培養(yǎng)基,、試劑盒和儀器,。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué),、分子生物學(xué),、免疫學(xué)、微生物學(xué),、診斷學(xué),、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué),、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域,。

Sphingomyelin 瓊脂糖珠(蛋白標(biāo)準(zhǔn)品)Sphingomyelin 瓊脂糖珠(蛋白標(biāo)準(zhǔn)品)