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FITC(Fluorescein Isothiocyanate,異硫氰酸熒光素)純品為黃色或橙黃色結晶粉末,,易溶于水和酒精溶劑,。FITC分子量為389。4,,最大吸收光波長為 490~495nm,,最大發(fā)射光波長為520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,。FITC在冷暗干燥處可保存多年,,是目前應用廣泛的熒光素。由于 FITC是小分子化合物,,每一個抗體可標記幾個FITC分子,,IgM通常用小分子的熒光素標記,如FITC,、Cy3/5,、Texas Red等。然而FITC的最大缺點是淬滅快,,因此要和抗淬滅劑一起使用,。FITC性質穩(wěn)定,能與蛋白質結合,,是檢測組織細胞內蛋白質常用的熒光探針,。它還能標記抗體,可用于免疫組織化學單染或多重染色,。FITC熒光二抗主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感,,通常切片標本中的綠色熒光少于紅色,。缺點是在光照下 易淬滅,易受自發(fā)熒光影響,。
艾美捷FITC標記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)二抗:
貨號:115-095-003
靶標:小鼠
宿主:山羊
抗體形式:全IgG
特異性:IgG(H+L)
偶聯(lián)物:熒光素(FITC)
產(chǎn)品類別:全IgG親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):凍干固體
儲存與復溶:凍干固體應于2-8°C下保存,。使用標示體積的去離子水復溶,如有渾濁可離心澄清,。使用當天制備工作濃度,。產(chǎn)品在2-8°C下作為未稀釋液體可穩(wěn)定保存約6周。
復溶后的長期儲存:分裝后于-70°C或更低溫度下冷凍保存,。避免反復凍融,。或者,,加入等體積的甘油(ACS級或更優(yōu)),,使最終濃度達到50%,并以液體形式在-20°C下保存,。
有效期:自復溶之日起一年,。如果測試結果符合預期用途,有效期可以延長,。
純度:抗體通過免疫親和色譜法從抗血清中純化,,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進行純化。
緩沖液:0.01M磷酸鈉,、0.25M氯化鈉,,pH 7.6
穩(wěn)定劑:15 mg/ml牛血清白蛋白(無IgG、無蛋白酶)
防腐劑:0.05%疊d化鈉
建議的工作濃度或稀釋范圍:大多數(shù)應用為1:50 - 1:200
稀釋因子以范圍形式給出,,因為最佳稀釋度是多種因素的函數(shù),,例如抗原密度、通透性等,。實際使用的稀釋度必須通過實驗確定,。
熒光素(FITC)
最大吸收波長(Amax):492 nm
最大發(fā)射波長(Emax):520 nm
FITC(異硫氰酸熒光素)是我們用于抗體和純化蛋白偶聯(lián)的熒光素形式,鏈霉親和素除外,。熒光素偶聯(lián)物在492 nm處吸收光強,,在520 nm處熒光強。盡管其亮度不如其他綠色熒光染料,,但由于其歷史悠久,,FITC仍然是廣泛使用的熒光團之一。熒光素的主要缺點是其快速光漂白(褪色),,可以通過在封片介質中使用抗褪色劑來緩解,。對于許多涉及FITC的應用,Alexa Fluor 488是一個更好的選擇,因為它更亮且更耐光,。
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