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Cy3最大激發(fā)光波長(zhǎng)為570nm,最大發(fā)射光波長(zhǎng)為650nm,呈綠色熒光,。但是在綠光光譜波長(zhǎng)激發(fā)下,Cy3也可出現(xiàn)紅色熒光,。Cy3屬于花菁類染料 (Cyanine Dyes),,常見的Cy系列染料主要包括有Cy2,、Cy3、Cy5等,,能與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)合,。這類染料的熒光特性與傳統(tǒng)熒光素類似,但水溶性和對(duì)光穩(wěn)定性 較強(qiáng),,熒光量子產(chǎn)率較高,,對(duì)pH等環(huán)境不敏感。常用于多重染色,。Cy3在氬光燈(514nm或528nm)下可以被激發(fā)出50%的光強(qiáng),,在氦氖燈 (543nm)或者汞燈(546nm)下則約75%的光強(qiáng)。 Cy3可以和熒光素一起作雙標(biāo),。Cy3還可以和Cy5一起在共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn)中作多標(biāo)記,。Cy3和Cy5比其他的熒光團(tuán)探針要更亮,更穩(wěn)定,,背景更弱,。因 為激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)很接近TRITC,在熒光顯微鏡中,,可使用和TRITC一樣的濾波片,。
艾美捷Cy3標(biāo)記親和純化山羊抗兔IgG(H+L)二抗:
貨號(hào):111-165-003
目標(biāo)抗原:兔
宿主:山羊
抗體形式:完整IgG
特異性:IgG(H+L)
偶聯(lián)物:賽安青™3(Cyanine Cy™3)
產(chǎn)品類別:完整IgG親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):冷凍干燥固體
儲(chǔ)存和復(fù)溶:將冷凍干燥固體儲(chǔ)存于2-8°C。使用指定體積的去離子水(參見產(chǎn)品說明書)復(fù)溶,,若溶液不澄清,,可離心。使用當(dāng)天制備工作液,。產(chǎn)品作為未稀釋液體在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周,。
復(fù)溶后的長(zhǎng)期儲(chǔ)存:分裝后冷凍于-70°C或更低溫度。避免反復(fù)凍融,?;蛘撸尤氲润w積的甘油(ACS級(jí)或更優(yōu)),,使最終濃度達(dá)到50%,,并以液體形式儲(chǔ)存于-20°C。
有效期:從復(fù)溶之日起一年,。如果測(cè)試結(jié)果符合預(yù)期用途,,有效期可以延長(zhǎng)。
純度:該抗體通過免疫親和層析法從抗血清中純化,,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化,。
緩沖液:0.01M磷酸鈉,0.25M NaCl,pH 7.6
穩(wěn)定劑:15 mg/ml牛血清白蛋白(無IgG,,無蛋白酶)
防腐劑:0.05%疊d化鈉
建議的工作濃度或稀釋范圍:大多數(shù)應(yīng)用:1:100 - 1:800
稀釋倍數(shù)以范圍形式呈現(xiàn),,因?yàn)樽罴严♂尡稊?shù)取決于許多因素,如抗原密度,、通透性等,。實(shí)際使用的稀釋倍數(shù)必須通過實(shí)驗(yàn)確定。
偶聯(lián)物:賽安青™3(Cyanine Cy™3)
最大吸收波長(zhǎng)(Amax):550 nm
最大發(fā)射波長(zhǎng)(Emax):570 nm
賽安青™3(Cy3)比其他橙紅色熒光染料偶聯(lián)物更亮,、更耐光,,并且背景更低。賽安青™3偶聯(lián)物在550 nm處達(dá)到最大激發(fā),,發(fā)射峰為570 nm,。在熒光顯微鏡下,賽安青™3可以通過傳統(tǒng)的四甲基羅丹明(TRITC)濾光片組觀察,,因?yàn)槠浼ぐl(fā)和發(fā)射光譜幾乎與TRITC w全相同,。我們推薦賽安青™3作為TRITC的更亮替代品。賽安青™3可以用氬激光(514 nm或528 nm線)激發(fā)到最大值的約50%,,或者用氦氖激光(543 nm線)或汞燈(546 nm線)激發(fā)到最大值的約75%,。賽安青™3可以與熒光素一起用于雙重標(biāo)記;然而,,建議使用窄帶通發(fā)射濾光片來最小化賽安青™3在FITC濾光片組中的熒光。賽安青™3也可以與亞歷山大熒光素®647(Alexa Fluor® 647)一起用于共聚焦顯微鏡的多重標(biāo)記,。然而,,羅丹明紅-X是多重標(biāo)記的更好選擇,因?yàn)槠錈晒饨橛诰G色熒光染料(如亞歷山大熒光素®488)和遠(yuǎn)紅色熒光染料(如亞歷山大熒光素®647)之間,。
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