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AP(Alkaline Phosphatase,,,,堿性磷酸酶)屬于同源二聚體蛋白,分子量為56KDa,。堿性磷酸酶是一種能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化的酶,,即通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,,這類底物包括核酸,、蛋白、生物堿等,。而該脫去磷酸基團(tuán)的過程被稱為去磷酸化或脫磷酸化,。堿性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品常用的標(biāo)記酶之一。與辣根過氧化物酶(HRP)相比,,AP用作標(biāo)記酶的優(yōu)點(diǎn)是:穩(wěn)定性高,、靈敏度高,缺點(diǎn)是成本高,,標(biāo)記困難,。堿性磷酸酶的色原底物常用的是對硝基苯磷酸鹽(pNPP)。pNPP在堿性磷酸酶的作用下生成對硝基酚(pNP),,其在405nm處有最大吸收,。BCIP/NBT也是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,,BCIP會被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,,該產(chǎn)物會和NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan,。
艾美捷堿性磷酸酶AP標(biāo)記親和純化F(ab')2片段化山羊抗人IgG(H+L)二抗:
貨號:109-056-003
靶標(biāo):人
宿主:山羊
抗體形式:F(ab')2片段
特異性:IgG(H+L)
偶聯(lián)物:堿性磷酸酶
產(chǎn)品類別:F(ab')2片段親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):凍干固體
儲存和復(fù)溶:將凍干固體儲存于2-8°C,。按照產(chǎn)品說明書指示的體積用去離子水復(fù)溶,如果溶液不澄清,,可以離心,。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作液。產(chǎn)品作為未稀釋的液體在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周,。
復(fù)溶后的長期儲存:加入等體積的甘油(ACS級或更優(yōu)),,使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存,。
有效期:從復(fù)溶日期起一年,。如果測試結(jié)果符合預(yù)期用途,有效期可以延長,。
純度:抗體通過胃蛋白酶消化和免疫親和層析從抗血清中純化,,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化,。Fc片段和完整的IgG分子已被去除。
緩沖液:0.01MTris-HCl,,0.25M氯化鈉,,pH8.0
穩(wěn)定劑:15mg/ml牛血清白蛋白(無IgG,無蛋白酶)
防腐劑:0.05%疊d化鈉
建議的工作濃度或稀釋范圍:
-ELISA:1:5,000-1:50,000
-Westernblot:1:5,000-1:50,000
稀釋因子以范圍形式呈現(xiàn),,因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),,例如抗原密度、通透性等,。實(shí)際使用的稀釋度必須通過實(shí)驗(yàn)確定,。
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