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許多具有生物活性的肽和蛋白質(zhì)以焦谷氨酸(pGlu)作為其第一個(gè)氨基酸。這種修飾可以保護(hù)它們免受氨基肽酶的降解,,并且在許多情況下決定了蛋白質(zhì)或肽的功能,。然而,焦谷氨酸修飾有時(shí)也可能導(dǎo)致負(fù)面副作用,。例如,,經(jīng)過焦谷氨酸修飾的β-淀粉樣肽(pGlu-Aβ)比未修飾的淀粉樣肽聚集速度更快,并且會(huì)形成毒性寡聚物,,可能會(huì)損傷神經(jīng)元,。最近的研究將pGlu-Aβ與阿爾茨海默病聯(lián)系起來,因?yàn)樗堑矸蹣影邏K的主要成分之一,。
焦谷氨酸可以在谷氨酰胺或谷氨酸自發(fā)轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸時(shí)形成,。然而,在谷氨酰胺環(huán)化酶(QC)的存在下,,這種環(huán)化反應(yīng)速率會(huì)顯著增加,,谷氨酰胺環(huán)化酶也被稱為谷氨酰胺肽環(huán)轉(zhuǎn)移酶(QPCT)。人類谷氨酰胺環(huán)化酶已從神經(jīng)組織中分離出來,,并在腦脊液和唾液中被檢測(cè)到,。
SensoLyte綠色谷氨酰胺環(huán)化酶活性檢測(cè)試劑盒提供了一種便捷的兩步均相程序,用于使用綠色熒光底物測(cè)量來自各種來源的酶活性,。在第一步中,,底物與谷氨酰胺環(huán)化酶或含酶樣本一起孵育,并轉(zhuǎn)化為焦谷氨酸形式。在第二步中,,加入谷氨酰胺環(huán)化酶顯色劑以去除pGlu殘基并生成綠色熒光團(tuán),。該熒光團(tuán)可以在490 nm激發(fā)波長(zhǎng)和520 nm發(fā)射波長(zhǎng)下被檢測(cè)到。產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度與酶活性成正比,。該試劑盒非常適合用于高通量篩選(HTS)谷氨酰胺環(huán)化酶激活劑和抑制劑,。綠色熒光團(tuán)的長(zhǎng)波長(zhǎng)受細(xì)胞成分和測(cè)試化合物自身熒光的干擾較小。檢測(cè)靈敏度為1.5 ng/mL的活性酶,。
艾美捷AnaSpec-SensoLyte綠色谷氨酰胺環(huán)化酶活性檢測(cè)試劑盒(#AS-72230)成分:
成分A:谷氨酰胺環(huán)化酶綠色底物:DMSO中的0.5 mM,,50 µL
成分B:焦谷氨酸熒光底物標(biāo)準(zhǔn)品:DMSO中的0.5 mM,15 µL
成分C:谷氨酰胺環(huán)化酶(人重組):50 µg/mL,,10 µL
成分D:谷氨酰胺環(huán)化酶顯色劑,,250倍濃縮:25 µL
成分E:檢測(cè)緩沖液:30 mL
成分F:谷氨酰胺環(huán)化酶抑制劑(1-芐基咪唑):DMSO中的1 M,75 µL
特性:
吸收波長(zhǎng)(nm):490
發(fā)射波長(zhǎng)(nm):520
儲(chǔ)存條件:將成分C和D儲(chǔ)存于-80°C,。將其他所有成分儲(chǔ)存于-20°C,。成分E可在室溫下儲(chǔ)存以便于使用。保護(hù)成分A和B免受光照和潮濕,。
活性:
應(yīng)用:FRET(熒光共振能量轉(zhuǎn)移),、蛋白酶活性檢測(cè)
生物標(biāo)志物靶點(diǎn):谷氨酰胺環(huán)化酶
檢測(cè)方法:熒光法
檢測(cè)限:1.5 ng/mL
研究領(lǐng)域:
細(xì)胞生物學(xué)與蛋白質(zhì)分析
神經(jīng)科學(xué)
子分類研究領(lǐng)域:
阿爾茨海默病
用途:僅限研究使用
來源:
宿主
大腸桿菌(E. coli)和桿狀病毒(Sf 21)衍生
AnaSpec-SensoLyte綠色谷氨酰胺環(huán)化酶活性檢測(cè)試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
AS-72225 SensoLyte520 BACE2 Activity Assay Kit Fluorimetric - 1 kit
AS-72214 SensoLyte Thioflavin T ?-Amyloid (1-42) Aggregation Kit - 1 kit
艾美捷科技是AnaSpec的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),。
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