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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>巖藻糖Fucose--從結(jié)構(gòu)到功能的多面性解析
巖藻糖(fucose)是六碳糖的一種,又稱6- 脫氧- L- 半乳糖,,并可以看做是一種甲基戊糖,。自然界存在的巖藻糖絕大多數(shù)為L- 巖藻糖,D構(gòu)型的巖藻糖僅作為稀有糖,,發(fā)現(xiàn)于一些糖苷類化合物中,。
L- 巖藻糖較大量地存在于海藻及樹膠中,也發(fā)現(xiàn)于某些細菌的多糖中,。巖藻糖作為糖蛋白中糖鏈的組成部分,,廣泛存在于各類細胞表面的質(zhì)膜上。巖藻糖比一般六碳糖在第六碳原子上少一個羥基,,所以巖藻糖比其他單糖親水性弱,,而疏水性強一些。在某些血型物質(zhì)分子中的巖藻糖是一定的血型的標(biāo)記,。
通常從海藻中提取巖藻糖,,先用酸處理,中和后,,以苯腙形式析出,,除去苯肼,,可得α-L- 巖藻糖結(jié)晶,熔點145℃,。
艾美捷巖藻糖Fucose:
貨號:AS07-268
免疫原:與N-糖鏈以α1,3鍵結(jié)合的核心巖藻糖殘基
宿主:兔
克隆性:多克隆
純度:免疫原親和純化的血清,,溶于pH 7.4的PBS中
形式:凍干粉
數(shù)量:50 µg
復(fù)溶方法:復(fù)溶時加入50 µl無菌水
儲存條件:凍干粉/復(fù)溶后于-20°C保存;復(fù)溶后請分裝,,避免反復(fù)凍融,。打開管子前請短暫離心,以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導(dǎo)致的損失,。
額外信息:α(1,3)巖藻糖不僅存在于植物中,,也存在于某些無脊椎動物(如線蟲、蜜蜂等)中,。然而,,與這些生物的糖蛋白發(fā)生的交叉反應(yīng)比在植物中觀察到的要弱。這種糖殘基在哺乳動物的內(nèi)源性糖蛋白中不存在,。
推薦稀釋度:0.5 µg/ml(ELISA),、1:40(免疫層析)、1 µg/10 ml(Western Blot)
預(yù)期/表觀分子量:對于各種糖蛋白,,分子量為10 - 100 kDa
已確認的反應(yīng)性:高等植物,、三角褐藻(Phaeodactylum tricornutum,一種硅藻)
預(yù)測的反應(yīng)性:高等植物,、三角褐藻
未反應(yīng)的生物:目前尚未發(fā)現(xiàn)與預(yù)測反應(yīng)性不符的已確認例外情況
額外信息:對照品:
蜂毒磷脂酶A2(PLA2),,僅含有α1.3巖藻糖,Sigma產(chǎn)品編號P9279
Ⅱ型辣根過氧化物酶,,含有β1.2木糖和α1.3巖藻糖,,Sigma產(chǎn)品編號P8250
該抗體不識別α1,6巖藻糖
應(yīng)用實例:
左圖:擬南芥野生型的總細胞提取物(1)和巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶缺陷的不同突變體的細胞提取物(2-5)(數(shù)據(jù)不是已出版)。一抗的使用濃度為10µg/10ml孵育緩沖液,。使用增強化學(xué)發(fā)光(ECL)進行檢測,。
右圖:抗巖藻糖和抗木糖抗體與各種對照的斑點印跡反應(yīng):Avidin(Fuc+/Xyl+)、胎球蛋白(Fuc-/Xyl-),、PLA2(Fuc+/Xyl-)和Mur1-2(Fuc-/Xyl+),。將2µl每種提取物點在硝化纖維膜上,放置在2個WHATMAN過濾器(一個浸在TBS-T中)的頂部 在室溫下干燥1.5小時,。用TBS-T中的2%低脂奶粉(0.1%吐溫20)封閉膜30分鐘,,并用抗巖藻糖(1)(AS072681:1000)或抗木糖(2)(AS07 2671:1000)30分鐘,然后用二抗兔(1:1000)抗體(ALP 結(jié)合的推薦二抗AS09 607),。在反應(yīng)展開之前,,用TBS-T洗滌膜3 x 10分鐘,使用 堿性磷酸酶試劑BCIP®/NTB預(yù)混溶液(Sigma,,編號B6404),。
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