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核糖體S6激酶1/2(S6K1/2)參與TOR信號通路,,參與滲透脅迫反應,。被PDK1激活,,在滲透脅迫下被抑制,。在所有組織中表達,,特別是在生長芽、根尖,、葉緣和發(fā)芽種子的高代謝活動期間,。替代名稱:AtPK1/AtPK6 S6K1)、AtPK2/AtPK19(S6K2),。
艾美捷S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化:
貨號:AS13-2664
免疫原:與KLH偶聯(lián)的肽段,,含有磷酸化蘇氨酸(phospho-Thr),來源于擬南芥S6K1(UniProt: P42818,,TAIR: AT3G08730)和S6K2(UniProt: Q39030,,TAIR: AT3G08720),。由于高度氨基酸同源性,所選肽段在這兩種蛋白(S6K1和S6K2)中均保守,。
宿主:兔子
克隆性:多克隆
純度:免疫原親和純化的血清,,溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(PBS)中。
形式:凍干
數(shù)量:50 µg
復溶:復溶時加入50 µl無菌水,。
儲存:凍干品/復溶后儲存于-20°C,;復溶后請分裝保存,避免反復凍融,。打開前請短暫離心管子,,以避免因物質(zhì)粘附在管蓋或管壁上而導致的損失。切勿在4°C下儲存該抗體,。
測試應用:西方印跡(WB)
推薦稀釋度:1:500(WB)
預期 | 表觀分子量:S6K1為52.6 kDa,,S6K2為53 kDa | 60 kDa
確認的反應性:擬南芥
預測的反應性:甘藍、鹽芥
未反應的:目前尚未發(fā)現(xiàn)與預測反應性不符的已知例外,。
應用舉例:
從10天齡的擬南芥幼苗中提取30 µg總蛋白,,提取緩沖液為Lacus緩沖液,有或無磷酸酶抑制劑,,并在變性前于4°C保存,。樣品在95°C下變性5分鐘,隨后在6.5% SDS-PAGE上分離,,并轉(zhuǎn)印至PVDF膜,,轉(zhuǎn)印時間為2小時。磷酸酶處理使用CIAP(“+"表示添加磷酸酶抑制劑,,“-"表示未添加磷酸酶抑制劑),。膜在室溫下用5%脫脂奶粉(TBST)封閉1小時,期間不斷攪拌,。膜在4°C下用一抗(稀釋度1:500)孵育過夜,,期間不斷攪拌。棄去抗體溶液后,,膜用TBST洗滌三次,,每次15分鐘,期間不斷攪拌,。膜在室溫下用二抗(山羊抗兔IgG,,辣根過氧化物酶偶聯(lián),Agrisera,,AS09 602)孵育1小時,,稀釋度為1:10,000,期間不斷攪拌。膜用上述方法洗滌后,,用ECL顯色5分鐘,,按照制造商的說明操作。曝光時間為幾分鐘,。
感謝西班牙CRAG的Rossana Henriques博士提供支持,。
其他信息(應用):
蛋白質(zhì)提取后,提取物必須立即進行SDS-PAGE電泳,,不得冷凍。
S6K1-2|核糖體蛋白S6激酶同源物1,2-磷酸化文獻參考:
Tanigawa et al. (2024). FYVE1/FREE1 is involved in glutamine-responsive TORC1 activation in plants. iScience. 2024 Aug 26;27(9):110814. doi: 10.1016/j.isci.2024.110814.
Li et al. (2023). Mitigating growth-stress tradeoffs via elevated TOR signaling in rice. Mol Plant. 2023 Dec 5:S1674-2052(23)00396-9. doi: 10.1016/j.molp.2023.12.002.
Primo et al (2022). Plasma membrane H+-ATPases promote TORC1 activation in plant suspension cells. iScience. 2022 Apr 11;25(5):104238. doi: 10.1016/j.isci.2022.104238. PMID: 35494253; PMCID: PMC9046228.
Wang et al. (2022), FERONIA functions through Target of Rapamycin (TOR) to negatively regulate autophagy, Front. Plant Sci., 23 August 2022, Sec. Plant Cell Biology, Volume 13 - 2022,
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