肽聚糖（粘肽）ELISA試劑盒是一種用于體外定量測量生物樣本中肽聚糖濃度的ELISA試劑盒,。目前處于開發(fā)階段,。

艾美捷肽聚糖(胞壁素)ELISA試劑盒：

貨號：abx585338

靶標：肽聚糖（粘肽）

反應性：通用（所有物種）

檢測應用：ELISA

推薦稀釋度：最終用戶應確定最佳稀釋度/濃度,。

儲存：運輸時溫度為4°C,。收到后，請按照試劑盒說明書中的儲存說明進行儲存,。

有效期：該試劑盒的有效期至少為6個月,。根據(jù)要求可提供長達12個月的有效期。

穩(wěn)定性：試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定,。在適當?shù)膬Υ鏃l件下,，有效期內(nèi)的損失率小于5%。為了盡量減少性能波動,，操作程序和實驗室條件應嚴格控制,。還強烈建議整個檢測過程由同一位用戶完成。

檢測范圍：1.23 ng/ml - 100 ng/ml

靈敏度：< 0.51 ng/ml

標準品形式：凍干

檢測方法：比色法

檢測類型：競爭法

檢測數(shù)據(jù)：定量

樣本類型：生物樣本,。

靶標類型：抗原

檢測原理：該試劑盒基于競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗技術,。96孔板上預先包被有抗體。將標準品,、測試樣本和生物素偶聯(lián)試劑加入到孔中并孵育,。生物素標記的粘肽和未標記的粘肽在預包被抗體上發(fā)生競爭抑制反應。然后加入HRP偶聯(lián)試劑,，并將整個板孵育,。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的偶聯(lián)物。使用TMB底物來定量HRP酶促反應,。加入TMB底物后,，只有含有足夠粘肽的孔才會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，加入酸性終止液后變?yōu)辄S色,。黃色的強度與板上結合的粘肽量成反比,。在微孔板讀數(shù)儀中以450 nm波長光譜光度法測量OD，從而可以計算出粘肽的濃度,。

試劑盒組成：列出的試劑盒組成僅供參考,。產(chǎn)品說明書可能略有不同。產(chǎn)品應按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用,。

預包被的96孔微孔板

標準品

標準品稀釋緩沖液

洗滌緩沖液

檢測試劑A

檢測試劑B

稀釋液A

稀釋液B

TMB底物

終止液

板封膜

所需但未提供的材料：

37°C培養(yǎng)箱

多通道和單通道移液管及無菌移液槍頭

噴霧瓶或自動微孔板洗滌器

1.5 ml管

蒸餾水

吸水濾紙

100 ml和1升量筒

微孔板讀數(shù)儀（波長：450 nm）

ELISA振蕩器

試劑準備：此程序僅供參考,。

標準品：用推薦體積的標準品稀釋緩沖液制備標準品溶液。然后按照協(xié)議中的指示,，用標準品稀釋緩沖液對標準品溶液進行系列稀釋,。

洗滌緩沖液：按照協(xié)議中的指示，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液,。

檢測試劑準備：計算所需的工作溶液的總體積,。分別用稀釋液A和稀釋液B將檢測試劑A和檢測試劑B稀釋1:100,。

檢測程序：此程序僅供參考。產(chǎn)品說明書可能略有不同,。產(chǎn)品應按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用,。

設置標準品、測試樣本和對照孔,。

將50 µl稀釋后的標準品加入到標準品孔中,。

將50 µl標準品稀釋緩沖液加入到對照（零）孔中。

將50 µl稀釋后的樣本加入到樣本孔中,。

立即向每個孔中加入50 µl檢測試劑A,。在37°C下孵育1小時。

洗滌3次,。

向每個孔中加入100 µl檢測試劑B,。在37°C下孵育30分鐘。

洗滌5次,。

向每個孔中加入90 µl TMB底物,。在37°C下孵育10-20分鐘。

加入50 µl終止液,。

在450 nm處測量OD,。

協(xié)議：此程序僅供參考。產(chǎn)品說明書可能略有不同,。產(chǎn)品應按照隨產(chǎn)品一起提供的產(chǎn)品說明書中的說明使用,。 在使用前將試劑盒組分和樣本平衡至室溫（18 - 25 °C）。建議每次測試繪制標準曲線,。

在預包被板上分別設置標準品,、測試樣本和對照（零）孔，然后記錄它們的位置,。建議每個標準品和樣本至少重復測量兩次,。

將50 µL的每個標準品、對照和樣本加入到相應的孔中,。

移除蓋子并丟棄液體,。

立即加入50 µl檢測試劑A工作溶液。用蓋子封住板,，在37°C下孵育1小時,。

移除蓋子并丟棄溶液。用1X洗滌緩沖液洗滌板3次,。

向每個孔中加入100 µL檢測試劑B工作溶液,，封住并孵育37°C 30分鐘。

丟棄溶液并按照前一步驟用洗滌緩沖液洗滌板5次,。

向每個孔中加入90 µl TMB底物。用蓋子封住板，在37°C下孵育10-20分鐘,。避免暴露在光下,。孵育時間僅供參考，最佳時間應由最終用戶確定,。不要超過30分鐘,。

向每個孔中加入50 µL終止液。立即在450 nm處讀取,。

結果計算：該檢測是競爭性的,，因此樣本中粘肽濃度與測量的吸光度之間存在負相關。創(chuàng)建一個以標準濃度的對數(shù)（y軸）和平均吸光度（x軸）為坐標的圖表,。通過標準點應用最佳擬合趨勢線,。樣本的粘肽濃度可以從標準曲線上插值得出。

檢測精密度：

批內(nèi)精密度（同一批次內(nèi)的精密度）：分別在一塊板上測試3個低,、中,、高濃度水平的肽聚糖樣本，每個樣本測試20次,。

批間精密度（不同批次之間的精密度）：在3塊不同的板上測試3個低,、中、高濃度水平的肽聚糖樣本,，每塊板上測試8個重復樣本,。

CV（%）=（標準差/平均值）×100

批內(nèi)精密度：CV<10%

批間精密度：CV<12%

注意事項：本品僅限研究使用。

范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化,。為獲得準確結果,，樣本濃度必須稀釋至試劑盒的中等范圍。請注意,，Abbexa的ELISA和CLIA試劑盒針對的是天然樣本的檢測,，而不是重組蛋白。Abbexa無法保證重組蛋白的檢測,，因為它們可能具有與天然蛋白不同的序列或三級結構,。

數(shù)據(jù)示例：

圖：顯示肽聚糖（Murein）標準OD數(shù)據(jù)的圖表