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BGT--血漿/血清,外泌體提取試劑盒-升級(jí)款基于自主研發(fā)的均質(zhì)液體磁珠,,可以特異性捕獲外泌體,,而無(wú)需吸附雜質(zhì),實(shí)現(xiàn)外泌體分離的高純度和高回收率,。它的優(yōu)點(diǎn)是容易操作,、高純度和高回收率,使其特別適合從血漿中分離外泌體和血清,。分離的外泌體可用于WB分析,、NTA或納米流粒度分析、電子顯微鏡檢測(cè),、組學(xué)研究,、細(xì)胞和動(dòng)物功能研究等。
艾美捷血漿/血清,,外泌體提取試劑盒-升級(jí)款:
編號(hào):A-EXO007
儲(chǔ)存:收到后,請(qǐng)按照儲(chǔ)存說(shuō)明存放試劑盒組件,。保質(zhì)期為12個(gè)月,。
提供的材料及儲(chǔ)存條件
試劑盒組件 規(guī)格(50T) 儲(chǔ)存條件
ExoMag外泌體珠子 Plus 5 mL 4°C
洗脫緩沖液 5 mL 室溫
溶液A 2 x 125 mL 4°C
未提供但必需的材料
高速冷凍離心機(jī)
平臺(tái)搖床
1.5 mL 離心管
磁性分離架
超濾管(分子量截止10 kDa)
樣本前處理
1. 細(xì)胞去除:在4°C下,,以300 g離心樣本5分鐘,。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,。對(duì)于無(wú)細(xì)胞樣本,,可以跳過(guò)此步驟,。
2. 細(xì)胞和細(xì)胞碎片去除:在4°C下,,以2000 g離心樣本10分鐘,。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,。
3. 大顆粒去除:在4°C下,,以14000 g離心第二步得到的上清液30分鐘。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
外泌體富集
1. 將100 μL的ExoMag外泌體珠子 Plus轉(zhuǎn)移到1.5 mL離心管中,,并將其放置在磁性分離架上30秒,。丟棄磁性珠子保護(hù)溶液。
2. 向上述ExoMag外泌體珠子 Plus中加入500 μL的預(yù)處理樣本(如果處理的樣本體積小于500 μL,,只需使用溶液A將樣本體積補(bǔ)足至500 μL),。將管固定在平臺(tái)搖床上,在室溫下以17 rpm孵育30分鐘,。在某些樣本中,,ExoMag外泌體珠子 Plus在與外泌體結(jié)合過(guò)程中可能會(huì)聚集在一起。然而,,這種聚集不影響分離效率,,因此您可以自信地繼續(xù)使用它們。
3. 將上述離心管放置在磁性分離架上,,靜置30秒,,丟棄上清液。
4. 加入1 mL的溶液A,,通過(guò)倒置管子混合,,將其放置在磁性分離架上,靜置30秒,,丟棄上清液,。
5. 再重復(fù)第四步兩次,保留ExoMag外泌體珠子 Plus,。
外泌體分離
1. 向ExoMag外泌體珠子 Plus中加入100 μL的洗脫緩沖液,,渦旋混合30秒。
2. 將管固定在平臺(tái)搖床上,,在室溫下以17 rpm孵育30分鐘,。
3. 將管放置在磁性分離架上,靜置30秒,,并將上清液轉(zhuǎn)移到新的1.5 mL離心管中,。這個(gè)上清液含有外泌體。外泌體不應(yīng)長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在洗脫緩沖液中,。如果需要長(zhǎng)期儲(chǔ)存,,請(qǐng)使用超濾管(分子量截止10 kDa)將溶液更換為PBS。
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