小鼠抗II型膠原5克隆單克隆抗體雞尾酒試劑盒,,配有大腸桿菌O111:B4的內毒素(LPS)。
艾美捷Arthrogen-CIA:致關節(jié)炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg:
貨號:53010
應用:用于小鼠膠原抗體誘導性關節(jié)炎(CAIA),。
規(guī)格:
雞尾酒:10 mg/ml x 1 ml
LPS:0.5 mg/ml x 1.5 ml
形式:一種溶解在0.05M磷酸鹽緩沖液(pH 7.4)中的5種單克隆抗體的混合物,,識別多種II型膠原的保守表位:克隆A2-10(IgG2a)、F10-21(IgG2a),、D8-6(IgG2a),、D1-2G(IgG2b)和D2-112(IgG2b)??寺2-10,、D1-2G和D2-112識別CB11片段(124-402)中167氨基酸肽片段LyC1(124-290)內的個別表位。克隆F10-21和D8-6識別CB11片段中的83氨基酸肽片段LyC2(291-374)內的表位,。
來源:小鼠
交叉反應性:對大多數II型膠原物種(包括小鼠,、豬、雞*,、牛,、人、鼠,、猴,、兔、馬和狗)有交叉反應,。
D2-112不與雞II型膠原交叉反應,。
動物:7-8周齡或更大的高反應小鼠:DBA/1、Balb/c,、B10.RIII,、C.B-17、scid/scid或129/Sv,。
低反應小鼠:C57BL/6或C57BL/6背景,。對CAIA的敏感性可能因小鼠供應商和設施而異。強烈建議使用特定病原體陰性(SPF)飼養(yǎng)條件,,而不是常規(guī)飼養(yǎng)條件,,因為細菌污染可能會降低動物的免疫反應,,導致關節(jié)炎減弱,。因此,建議在進行大規(guī)模研究之前先進行小規(guī)模的初步研究,。
使用:建議通過靜脈注射(即尾靜脈)給藥單克隆抗體雞尾酒,;不過,也可以使用腹腔注射(IP),。此外,,如果不希望使用LPS,請注意關節(jié)炎的嚴重程度往往較低,。
儲存條件:-80°C
穩(wěn)定性:2年
注意事項:
LPS是一種常見的細菌毒素,,是免疫系統(tǒng)的強效刺激物。推薦的Arthrogen-CIA®雞尾酒協議利用LPS注射來觸發(fā)快速出現的重度關節(jié)炎,,伴隨亞關節(jié)炎劑量的抗體,。LPS的最佳劑量可能因小鼠品系、動物供應商和飼養(yǎng)條件而異,。高劑量的LPS可能對實驗動物致命,,甚至50 μg/只,具體取決于動物的條件,。因此,,Chondrex, Inc.建議首先進行無抗體給藥的初步研究,,以優(yōu)化LPS劑量(50 μg、25 μg和可能的10 μg,,分別測試每個劑量并使用多只小鼠),,然后再進行大規(guī)模CAIA研究。
Arthrogen-CIA:致關節(jié)炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg實驗步驟:
A. 在CAIA易感小鼠(DBA/1,、Balb/c,、B10.RIII、C.B-17,、scid/scid或129/Sv)中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節(jié)炎
第0天:通過靜脈或腹腔注射1.5 mg的5克隆雞尾酒,。
第3天:通過腹腔注射25-50 μg的LPS。
注意:在第3-4天觀察到中度至重度關節(jié)炎,,約在第7-10天達到高峰,。
B. 在CAIA低反應小鼠(C57BL/6或C57BL/6背景)中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節(jié)炎
第0天:通過靜脈或腹腔注射5 mg的5克隆雞尾酒。
第3天:通過腹腔注射25-50 μg的LPS,。
注意:在第3-4天觀察到中度至重度關節(jié)炎,,約在第7-10天達到高峰。第10-14天注射LPS可用于重新刺激炎癥性關節(jié)炎,。
C. 在DBA/1和Balb/c小鼠中用不含LPS的單克隆抗體雞尾酒誘導關節(jié)炎
第0天:通過靜脈注射6-10 mg的5克隆雞尾酒,。
注意:在第2-3天可觀察到關節(jié)炎。該協議尚未在其他CAIA易感小鼠品系(如B10.RIII,、C.B-17,、scid/scid或129/Sv小鼠)中確認。
Arthrogen-CIA:致關節(jié)炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg文獻參考:
K. Terato et al. J. Immunol. 148: 2103-2108 (1992)
K. Terato et al. Autoimmunity 22: 137-147 (1995)
S. Yoshino et al. J. Immunol Methods 343: 49-55 (2009)
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