補(bǔ)體TCC是一種酶免疫測(cè)定法,，用于半定量測(cè)定可溶性人EDTA血漿中的末端補(bǔ)體復(fù)合物（sTCC,，也稱(chēng)為TCC或sC5b-9）。該產(chǎn)品僅供專(zhuān)業(yè)人士使用,。結(jié)果不得用于臨床診斷或患者管理,，僅供研究使用。

艾美捷Svar Life Science-Complement TCC：

產(chǎn)品代碼 COMPL TCC RUO

檢測(cè)目標(biāo) TCC

規(guī)格 96孔

技術(shù) ELISA

結(jié)果讀取 半定量

范圍 0-400納克/毫升

檢測(cè)時(shí)間 2小時(shí)

檢測(cè)系統(tǒng) 辣根過(guò)氧化物酶/TMB在450納米處讀取

監(jiān)管狀態(tài) 僅供研究使用

Svar Life ScienceiLite-Complement TCC內(nèi)容：

一個(gè)帶有微孔板孔（12x8）的框架,，孔內(nèi)涂有抗TCC單克隆抗體,，密封在帶有干燥劑的鋁箔包裝中。

1.5毫升低濃度對(duì)照（LC）,?？芍苯邮褂谩?/span>

1.5毫升高濃度對(duì)照（HC）,?？芍苯邮褂谩?/span>

2瓶30毫升稀釋液（Dil）,?？芍苯邮褂?。

15毫升含有辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的抗TCC抗體的結(jié)合物?？芍苯邮褂?。

15毫升底物TMB?？芍苯邮褂?。

15毫升終止液（0.5M硫酸）?？芍苯邮褂?。

30毫升洗滌液，30倍濃縮,。

6瓶1.5毫升的校準(zhǔn)液,，含有人類(lèi)純化的TCC，濃度分別為0納克/毫升,、10納克/毫升,、50納克/毫升、100納克/毫升,、200納克/毫升和400納克/毫升,。可直接使用,。

Svar Life ScienceiLite-Complement TCC檢測(cè)原理：

該檢測(cè)是一種比色夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）,。樣本在測(cè)定稀釋液中稀釋?zhuān)?span style="font-family: Calibri;">100微升稀釋后的樣本轉(zhuǎn)移到微孔板孔中，在室溫下孵育60分鐘,。在第一次孵育期間,，樣本中的TCC被預(yù)先涂覆在微孔板表面的抗TCC單克隆抗體捕獲。經(jīng)過(guò)洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,，添加第二種辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的單克隆抗體以檢測(cè)與孔結(jié)合的TCC,。再孵育30分鐘后，孔再次被洗滌,，并添加底物并進(jìn)行孵育,。顏色發(fā)展在30分鐘后停止，顏色在分光光度計(jì)中被測(cè)量,。顏色與與孔結(jié)合的TCC量直接成比例。通過(guò)與校準(zhǔn)樣本的顏色發(fā)展進(jìn)行比較,，確定TCC的量,。

結(jié)果計(jì)算

從450納米波長(zhǎng)中減去參考波長(zhǎng)，并計(jì)算所有樣本的平均光密度（OD）值,。通過(guò)將校準(zhǔn)液的OD值與濃度作圖,，構(gòu)建校準(zhǔn)曲線(xiàn),。六個(gè)校準(zhǔn)液的值分別為0納克/毫升、10納克/毫升,、50納克/毫升,、100納克/毫升、200納克/毫升和400納克/毫升,。根據(jù)校準(zhǔn)曲線(xiàn)讀取未知樣本的濃度,。

注意：本使用說(shuō)明書(shū)中的所有性能數(shù)據(jù)都是使用四參數(shù)曲線(xiàn)擬合計(jì)算的。用戶(hù)可以選擇不同的曲線(xiàn)擬合,。建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用選定的曲線(xiàn)擬合建立參考范圍,。

注意：計(jì)算樣本中TCC的濃度時(shí)，必須根據(jù)上面的協(xié)議進(jìn)行稀釋補(bǔ)償,，即10倍稀釋,。如果樣本結(jié)果超出校準(zhǔn)曲線(xiàn)的范圍，建議進(jìn)行更高倍數(shù)的稀釋?zhuān)⒃谟?jì)算樣本中的濃度時(shí)考慮這一點(diǎn),。

校準(zhǔn)器曲線(xiàn)示例：

請(qǐng)注意：上圖顯示了半定量標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的示例,，不應(yīng)用于實(shí)際樣品解釋

文獻(xiàn)參考：

Bergseth et al. Molecular Immunology 56 (2013) 232–239. An international serum standard for

application in assays to detect human complement activation products

Deppisch et al, Kidney Int. 1990 Feb;37(2):696-706. Fluid phase generation of terminal

complement complex as a novel index of bioincompatibility

Harboe et al, Adv Drug Deliv Rev. 2011 Sep 16;63(12):976-87. Advances in assay of

complement function and activation.

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