Calbiotech-CA19-9 ELISA試劑盒用于癌癥抗原的定量測定人血清或血漿中CA19-9濃度。

艾美捷Calbiotech-CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit：

目錄編號  CA238T

產(chǎn)品類型 ELISA

數(shù)量  96次測試（12x8易碎條狀井）

標準范圍 25-600 U/mL

樣本體積 25 微升/孔

物種   人類

儲存和穩(wěn)定性   將試劑盒存放在2 - 8°C的環(huán)境中,。確保微孔板密封在裝有干燥劑的干燥袋中,。試劑在試劑盒有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。不要將試劑暴露在熱源,、陽光或強光下,。

CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit檢測原理：

CA19-9elisa試驗是一種改良的固相序貫夾心ELISA。將樣品和生物素化的單克隆抗體加入涂有鏈霉抗生物素蛋白的孔中,?；颊邩颖局械?/span>CA19-9與生物素化捕獲抗體結(jié)合。生物素化的抗體同時與鏈霉抗生物素蛋白包被的平板結(jié)合,。洗滌步驟后,，加入抗CA19-9-HRP酶偶聯(lián)物，在捕獲的CA19-9周圍形成sa三明治,。未結(jié)合的抗體被洗掉。加入TMB底物導(dǎo)致藍色的發(fā)展,。CA19-9的濃度與顯色強度成正比,。生成顏色強度與CA19-9濃度相關(guān)的標準曲線。

檢測程序：

將所有樣本和試劑盒試劑放置至室溫（20-25°C）并輕輕混合,。

1. 在架子上固定所需數(shù)量的包被孔,。

2. 向相應(yīng)的孔中分配25 µl的CA19-9標準品、樣本和對照品,。

3. 向每個孔中分配100 µl的抗CA 19-9-生物素試劑（藍色溶液）,。

4. 在500-600 rpm下c底混合30秒鐘。w全混合非常重要,。

5. 在室溫下孵育60分鐘,。

6. 清除所有孔中的液體。用350 µL的1X洗滌緩沖液沖洗每個孔三次,。每次沖洗后,，將倒置的板子用力拍打在吸收性紙巾或紙巾上以去除殘留的液滴。

7. 向每個孔中分配100 µl的抗CA19-9-HRP酶結(jié)合物（紅色溶液）,。

8. 在室溫下孵育60分鐘,。

9. 按照步驟6描述的方法移除內(nèi)容物并沖洗板子3次。

10. 向每個孔中分配100 µl的TMB溶液,。

11. 在室溫下孵育15分鐘,，不要搖動,。

12. 通過向每個孔中添加50 µl的終止溶液來停止反應(yīng)。

13. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板吸收光度讀數(shù)器（使用630nm的參考波長）讀取450nm處的吸光度,。

計算和結(jié)果：

1. 計算每組參考標準,、對照和樣本的平均吸光度值（A450）。

2. 通過在圖表紙上繪制每個參考標準的平均吸光度與其濃度（以U/ml為單位）的圖表,，構(gòu)建標準曲線,，使用最佳擬合二次曲線在線性圖表紙上繪制，吸光度在垂直（y）軸上,，濃度在水平（x）軸上,。

3. 使用每個樣本的平均吸光度值，從標準曲線上確定相應(yīng)的CA19-9濃度（以U/ml為單位）,。

標準曲線示例：

典型的標準運行結(jié)果,，以450nm處的光密度讀數(shù)在Y軸上顯示，對應(yīng)于X軸上顯示的CA19-9濃度,。此標準曲線僅供示例,，不應(yīng)用于計算未知數(shù)。每個用戶應(yīng)在每次實驗中獲取自己的數(shù)據(jù)和標準曲線,。

CA19-9（Cancer antigen 19-9）ELISA Kit文獻參考：

Glenn, J., Steinberg, W.M., Kurtzman, S.H., et at.  Evaluation of the utility of a radioimmunoassay for serum CA 19-9 level in patients before and after treatment of carcinoma of the pancreas.  J. Clin. Oncol. 1988; 6:462-8.

Hayakawa, T., Kondo, T., Shibata, T. et al.  Sensitive serum markers for detecting pancreatic cancer.  Cancer 1988; 61:1827-31.

Koprowski, H., Herly, M., Steplewski, Z., et al.  Specific antigen in serum of patients with colon carcinoma. Science 1981; 212:53-5

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