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抗CD19 CAR慢病毒是復制能力不強、基于HIV的VSV-G假型慢病毒顆粒,,已準備好轉導大多數(shù)哺乳動物細胞,,包括原代細胞和非分裂細胞。這些病毒轉導與第二代CAR(嵌合抗原受體)連接的抗CD19(克隆FMC63)的ScFv部分,,該部分含有CD8鉸鏈和跨膜結構域,、4-1BB和CD3ζ信號結構域,。該構建體還包括抗CD19 CAR盒下游的IRES增強型綠色熒光蛋白(eGFP)序列,以促進轉導細胞的分析和分選(圖1),。
圖1,。(A) 用于產(chǎn)生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒載體示意圖。該向量是SIN向量,,它包含eGFP,。(B) 構建顯示抗CD19 CAR成分的圖。
注:該產(chǎn)品轉導的抗CD19 CAR構建體(CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ)與其他可用的抗CD19CAR慢病毒(BPS Bioscience#78600,、78601和78602)相同,,但在關鍵方面有所不同。該產(chǎn)品含有eGFP報告/選擇標記,,因此可以根據(jù)eGFP表達對轉導的細胞進行分類,。請參閱表1。
艾美捷抗CD19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z,,eGFP)(#BPS-78775):
提供形式:50微升的抗CD19 CAR,,滴度≥3×10^8 TU/ml。每批的滴度可能會有所不同,;確切的數(shù)值會隨每次發(fā)貨提供,。
配方:這些慢病毒是從HEK293T細胞生產(chǎn)的,經(jīng)過濃縮并重新懸浮在DMEM中,。
儲存/穩(wěn)定性:慢病毒隨干冰發(fā)貨。長期儲存建議在-80°C下保存慢病毒,,自收到之日起可保存長達12個月,。避免重復凍融。每次凍融都可能導致滴度顯著下降,。
培養(yǎng)基:
T細胞培養(yǎng)基:TCellM™(BPS Bioscience #78753)補充了10 ng/ml的白介素-2(BPS Bioscience #90184),。
實驗所需的培養(yǎng)基:
解凍培養(yǎng)基3(BPS Bioscience #60186):F-12K培養(yǎng)基(Kaighn對Ham's F-12培養(yǎng)基的改良)補充了10% FBS,1%青霉素/鏈霉素,。
應用:作為T細胞中抗CD19 CAR評估的陽性對照,。
轉導優(yōu)化實驗。
生成抗CD19 CAR-T細胞(僅限研究使用,,不用于治療目的),。
運輸溫度:-80°C。
抗CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體)相關產(chǎn)品:
Anti-CD19 CAR / NFAT (Luciferase) Reporter Jurkat Cell Line (CD19 SCFV-CD28-4-1BB-CD3ζ)
Anti-CD19 CAR-T Cells
Firefly Luciferase CD19 Knockout Raji Cell Line
CD19 Knockout Raji Cell Line
Firefly Luciferase CD19 Knockout NALM6 Cell Line
Human NK Cell Isolation Kit
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