abm的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是一種特別的聚陽離子和脂質(zhì)體配方,，保證在包括原代細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞類型中具有高轉(zhuǎn)染效率,。

艾美捷脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑（ABS-G2500）：

單位：1.0 毫升

存儲條件：存儲于4oC。請勿冷凍,。

特點：

Z小毒性

在一系列細(xì)胞中表現(xiàn)Z越

應(yīng)用：

將DNA轉(zhuǎn)染到培養(yǎng)的貼壁真核細(xì)胞中,。

脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑使用方法：

請使用以下條件作為指導(dǎo)，以在6孔板或35毫米培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞,。

1. 在轉(zhuǎn)染前18至24小時,，以70%的密度播種細(xì)胞。對于懸浮細(xì)胞,，以5 x 10^5 細(xì)胞/毫升的密度播種,。

2. 對于每個轉(zhuǎn)染樣本，請按以下方式準(zhǔn)備復(fù)合物：

溶液A：將2.0微克的DNA稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養(yǎng)基中,。

溶液B：在使用前通過彈動試管混合DNAfectin™ Plus,，然后將6-10微升的DNAfectin™ Plus稀釋到100微升無血清、無抗生素的培養(yǎng)基中,。

在室溫下孵育溶液A和溶液B 5分鐘,。

3. 合并溶液，輕輕混合以確保均勻分布,，并在室溫下孵育20分鐘,。

注意：復(fù)合物在室溫下穩(wěn)定3-5小時。

4. 向每個DNA-轉(zhuǎn)染復(fù)合物中加入0.8毫升無血清培養(yǎng)基,，并通過劇烈彈動試管充分混合,。

5. 抽吸每個孔中的所有培養(yǎng)基，然后將1.0毫升的轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物直接加入到每個孔中（對于貼壁細(xì)胞）,。對于懸浮細(xì)胞,，收集細(xì)胞并以300xg離心以收集細(xì)胞沉淀，用1.0毫升轉(zhuǎn)染復(fù)合物重懸,。然后將細(xì)胞和轉(zhuǎn)染復(fù)合物轉(zhuǎn)移到6孔板中,。孵育細(xì)胞。

6. 在5-8小時后,，移除轉(zhuǎn)染溶液,，加入2.0毫升完整培養(yǎng)基（含血清和抗生素）。繼續(xù)孵育細(xì)胞,。

7. 在48-72小時后,，可以使用適當(dāng)?shù)臋z測方法分析轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，或繼續(xù)進行穩(wěn)定細(xì)胞系的生成,。

8. 制造穩(wěn)定細(xì)胞系：在存在選擇標(biāo)記的情況下,，以與殺傷曲線確定中使用的密度相同的密度進行細(xì)胞傳代。