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武漢艾美捷科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第6年

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一文了解m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒

時(shí)間:2022/3/16閱讀:1012
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EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒用途:

EpiQuik™ 切割和運(yùn)行m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒旨在富集RNA含有來自低輸入RNAm6A丨片段,,并通過PCR或圖譜鑒定區(qū)域特異性m6A通過使用Illumina平臺(tái)或其他方法進(jìn)行下一代測(cè)序,獲得超轉(zhuǎn)錄組寬m6A,。創(chuàng)新的工作原理,、優(yōu)化的協(xié)議和套件組件允許捕獲m6A片段具有最小的非特異性背景水平。富集的RNA是特異性的適用于快速構(gòu)建非條形碼(單復(fù)合)和條形碼(復(fù)合)庫(kù),,允許m6A區(qū)域以較小的偏差和高分辨率進(jìn)行映射,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒輸入量:

一般來說,每個(gè)反應(yīng)的總RNA量在1µg20µg之間,。為了獲得最佳制備,,輸入量應(yīng)為10µg RNA,盡管數(shù)據(jù)可以從使用該試劑盒,,總RNA含量低至500納克,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒起始材料:

起始材料可以包括各種哺乳動(dòng)物細(xì)胞樣本,如培養(yǎng)物燒瓶或平板上的細(xì)胞,,從血液,、體液和血液中分離的原代細(xì)胞或稀有細(xì)胞群新鮮/冷凍組織、從整個(gè)細(xì)胞群和胚胎細(xì)胞中分離的特定細(xì)胞等,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒抗體:

本試劑盒中使用的抗m6A兔多克隆抗體對(duì)m6A具有高度特異性RNA片段,,MeRIP級(jí),與腺嘌呤非甲基化RNA片段無交叉反應(yīng),。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒注意事項(xiàng):

為避免交叉污染,,小心地用移液管將樣品或溶液移到試紙上威爾斯。使用氣溶膠屏障移液管頭,,并在液體轉(zhuǎn)移之間始終更換移液管頭,。穿在整個(gè)過程中佩戴手套。如果手套與樣品接觸,,立即更換手套,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒運(yùn)輸和儲(chǔ)存;

該套件分兩部分裝運(yùn):部分在室溫下裝運(yùn),,第二部分在室溫下裝運(yùn)4°C下的冷凍冰袋。拿到后,,根據(jù)上表中的溫度將部件存放在避光處。正確儲(chǔ)存后,,試劑盒可自裝運(yùn)之日起穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒注意:使用前檢查WB(洗滌緩沖液)是否含有鹽沉淀物。如果是這樣的話,,在房間里短暫暖和一下加熱或37°C,,搖動(dòng)緩沖液,直到鹽重新溶解,。

 

EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒程序

EpiQuik™ 切割和運(yùn)行m6A RNA富集(MeRIP)試劑盒包含所需的所有必要試劑用于從總RNA開始進(jìn)行成功的m6A RNA富集,。在反應(yīng)中,RNA在含有m6A的靶區(qū)的兩端中的序列被切割/移除,,并且靶區(qū)使用珠子結(jié)合的m6A捕獲抗體將含有m6A的片段拉下,。豐富的然后釋放、純化和洗脫RNA,。試劑盒中包括非免疫IgG對(duì)照品和m6A陽性對(duì)照,。這些可以用來證明試劑盒的有效性和性能富集RNA定量或生物分析儀步驟。


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