Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑,，在正常細胞中,，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細胞發(fā)生凋亡早期,，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè),。Annexin V作為一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,，它通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合,。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo),。

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艾美捷/Annexin V 是一種在大腸桿菌中表達的重組蛋白。細胞結(jié)構(gòu)的一些變化在細胞凋亡過程中發(fā)生,。一個主要的變化是膜磷脂不對稱性的喪失,，伴隨著磷脂酰絲氨酸的移位（PS）從磷脂雙層的內(nèi)小葉到外表面。

艾美捷/Annexin V建議的染色方案：

1.在冷PBS中清洗細胞兩次

2.在冷1X ApoScreen®中重新使用電池膜聯(lián)蛋白結(jié)合緩沖液（SB目錄號10045-01）濃度為1 x 106細胞/mL

3.加100mL細胞懸液至5mL聚苯乙烯圓底管

4.加10m共軛ApoScreen®Annexin V

5.輕輕旋轉(zhuǎn)每根試管,，在2-8°C溫度下培養(yǎng)15分鐘,，并避光

6.在不清洗的情況下，添加~380m冷1X ApoScreen®Annexin 結(jié)合緩沖液到每根管

7.加10mApoScreen®的L7-氨基放丨線丨菌素D（7-AAD,；SB分類號10042-01）或ApoScreen®碘化丙啶（PI,；SB類別號。

艾美捷/Annexin V儲存方式：

1.純化的（UNLB）ApoScreen®Annexin V 以0.1mg純化的重組蛋白形式從PBS中凍干,。儲存材料在重構(gòu)前的-20°C溫度下,。用1.0毫升的dH2O重新配制。將再造材料儲存在2-8°C的溫度下,。

2.熒光素（FITC）,、生物素（BIOT）和菁5（CY5）ApoScreen®附錄V結(jié)合物在1.0毫升的溶液中作為100次試驗提供ApoScreen®Annexin V 結(jié)合緩沖液。在2-8°C下儲存,。

3.R-藻紅蛋白（PE）和別藻藍蛋白（APC）ApoScreen®在1.0毫升PBS/NaN3中,，以100次試驗的形式提供膜Annexin V結(jié)合物和穩(wěn)定劑。在2-8°C下儲存,。不要冷凍,！

4.保護熒光色素結(jié)合物不受光照。如果按照指示儲存,，試劑在標(biāo)簽上顯示的時間內(nèi)是穩(wěn)定的,。