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影響生物水結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的因素 無機離子生命體系中大量存在的無機離子的靜電荷,,使水分子圍繞其周圍徑向排列,形成有序的離子水化層,。
一氧化氮(NO)在神經(jīng)傳遞,、血管調(diào)節(jié)、免疫等方面起著重要作用反應(yīng)與細(xì)胞凋亡,。由于NO迅速轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽(NO2-)以及硝酸鹽(NO3)-),亞硝酸鹽和硝酸鹽的總濃度用作NO的定量測量生產(chǎn),。
艾美捷 BioVision 一氧化氮熒光檢測試劑盒可提供準(zhǔn)確、可靠的檢測結(jié)果在一個簡單的兩步過程中方便地測量總硝酸鹽/亞硝酸鹽濃度,。
在步中,,硝酸鹽通過硝酸還原酶轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽。第二步,,亞硝酸鹽與熒光探針DAN(2,,3-二氨基萘)反應(yīng),。NaOH提高了反應(yīng)速率熒光產(chǎn)率。熒光強度與總一氧化氮生成量成正比,。使用培養(yǎng)基,、血漿和組織勻漿對試劑盒進行了測試。
計算方法:
1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:繪制熒光與硝酸微微摩爾,。
2.測定樣品硝酸鹽和亞硝酸鹽濃度:
圖:在硝酸還原酶存在和不存在的情況下進行亞硝酸鹽,、硝酸鹽測定。分析結(jié)果如下:根據(jù)試劑盒方案,,在步驟5將硝酸鹽轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽1小時,。
一氧化氮熒光檢測試劑盒重組:
1、分析緩沖液:分析緩沖液可隨時使用,。在4°C下儲存。
2,、酶輔因子:與110μl dH2O重組,,制成10 mM儲備溶液。等分并在-20°C下儲存,。冷凍/解凍時間應(yīng)限制為1次,。適當(dāng)稀釋部分10X,以制備1 mM工作溶液,。使用時請保持在冰上,。工作溶液可在4℃下儲存6-8小時。
3,、增強子:用1.2毫升的分析緩沖液重組,。在使用過程中保持冰上狀態(tài)。儲存在-20攝氏度,。
4,、硝酸還原酶:用1.2毫升分析緩沖液重新組合。等分所需數(shù)量并儲存在-20°C下,。使用過程中請保持在冰上,。冷凍/解凍時間應(yīng)限制為1次。
5,、硝酸鹽/亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品:用1.0 ml分析緩沖液重新配制,,旋渦產(chǎn)生每個標(biāo)準(zhǔn)10毫米。不使用時,,在4°C下保存(不要冷凍?。V亟M的標(biāo)準(zhǔn)品在4°C下儲存4個月后穩(wěn)定,。
6,、DAN探針和氫氧化鈉:隨時可用,。在4°C下儲存。
相關(guān)研究工具:
1.一氧化氮比色分析試劑盒
2.谷胱甘肽熒光和比色檢測試劑盒
3.乳酸,、丙酮酸,、NADH/NAD、葡萄糖,、蔗糖,、乳糖、麥芽糖分析試劑盒,。
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