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慢病毒滴度檢測是檢驗(yàn)慢病毒是否合格的方法之一,。在一些特定的實(shí)驗(yàn)中,我們需要為病毒的濃度,即滴度,進(jìn)行測定,。由于慢病毒載體的不同以及客戶需求的不同,有的慢病毒會(huì)帶有熒光標(biāo)記,,而有的沒有,,故而滴度檢測也有不同的方法。
一,、ELISA法
傳統(tǒng)的p24 ELISA可檢測到293細(xì)胞在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染過程中產(chǎn)生的病毒相關(guān)p24和游離p24,,而游離的p24可以占上清液中p24總量的很大一部分。因此,,傳統(tǒng)的p24 ELISA通常會(huì)高估存在的慢病毒的數(shù)量,。
新的QuickTiter慢病毒滴度試劑盒(與慢病毒相關(guān)的HIV p24)可zui大程度地減少此問題。一項(xiàng)專有技術(shù)可在運(yùn)行測定的ELISA部分之前,,將慢病毒與溶液中的游離p24分離,。
二、Real-time PCR法
GeneCopoeia的Lenti-Pac 慢病毒滴度檢測試劑盒系列產(chǎn)品為簡便,、快速檢測慢病毒顆粒的滴度而設(shè)計(jì)。試劑盒包含從RNA抽提到qRT- PCR檢測過程的全套試劑,,樣品經(jīng)過RNA抽提,、DNase消化、反轉(zhuǎn)錄,、qRT-PCR步驟即可確定慢病毒滴度,。
特點(diǎn):
1.能夠判斷慢病毒是否包裝成功;
2.準(zhǔn)確測定病毒拷貝數(shù),,以確保細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因表達(dá)的效率,;
3.提供滴度檢測過程從病毒的RNA提取到qPCR檢測所需要的試劑。
綜上,,慢病毒滴度檢測:ELISA法結(jié)合qPCR法,,想怎么測就怎么測~
文章來源:艾美捷科技
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