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分子診斷研發(fā)不再是難題,,看看一步法多重PCR試劑盒-(基于探針)!
多重PCR(multiplex PCR),,又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR,,它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對以上引物,,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng)。其反應(yīng)原理,,反應(yīng)試劑和操作過程與一般PCR相同,,但多重PCR和在很多應(yīng)用中有巨大的優(yōu)勢,深受分子診斷領(lǐng)域研究者與的喜愛:
1.高通量 (每個(gè)反應(yīng)孔可分析更多樣本,,產(chǎn)出顯著提高)
2.更低的樣本用量和試劑用量(特別適合樣品,,降低成本)
3.更高的實(shí)驗(yàn)精度,使加樣精度錯(cuò)誤小化
目前多重PCR也面臨著一些問題:
1.PCR通常需要充分優(yōu)化退火條件,,以便對不同的引物–模板系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)*效率的擴(kuò)增,。這種類型的PCR經(jīng)常受到非特異性PCR產(chǎn)物的影響。嚴(yán)格的熱啟動(dòng)程序和特別優(yōu)化的緩沖溶液系統(tǒng)對于成功的多重PCR是非常關(guān)鍵的,。
2.多重PCR所面對的另外一個(gè)挑戰(zhàn)是,,不同的引物對之間,雜交動(dòng)力學(xué)性質(zhì)不同,。結(jié)合效率更高的引物能更充分的利用PCR反應(yīng)試劑,,從而導(dǎo)致其它PCR產(chǎn)物的減少。這通常會(huì)導(dǎo)致一些本應(yīng)該被擴(kuò)增的產(chǎn)物沒有出現(xiàn),。有一些商業(yè)化的試劑盒經(jīng)過特別的設(shè)計(jì),,可以避免這種情況。
Real-time RT-PCR可以通過一步法或者兩步法完成,,兩者各有優(yōu)劣,。一步法快速的流程,可以迅速的處理多個(gè)樣本,,并且易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,。操作步驟的減少提高了不同樣本結(jié)果的可重復(fù)性,并且由于減少了操作,,降低了樣本被污染的風(fēng)險(xiǎn),。
為此,我們推薦使用Solis BioDyne研發(fā)的高靈敏度,、高特異性,、高穩(wěn)定性的一步法多重PCR試劑盒-(基于探針),SOLIScript 1-step Multiplex Probe 試劑盒系列產(chǎn)品:
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit | 08-55-00250 | 所有PCR儀器,;但Applied BioSystems™和Agilent除外 |
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SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (ROX) | 08-59-00250 | Applied BioSystems™ 和Agilent的PCR儀器 | ROX JUN Texas Red |
SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit (Purple) | 08-61-00250 | Applied BioSystems™ PCR儀器(需含Mustang Purple®通道) | Cy5 |
SOLIScript™ 1-step Multiplex Probe Kit(一步法多重PCR試劑盒-基于探針)可在同一個(gè)管子中高特異性的執(zhí)行cDNA合成與基于探針的qPCR反應(yīng),。更多優(yōu)點(diǎn)如下:
1.的特異性:獨(dú)*改造的耐熱型逆轉(zhuǎn)錄酶,cDNA合成高達(dá)60℃,。
2.多重反應(yīng)(高通量):一個(gè)反應(yīng)可同時(shí)分析1-4個(gè)靶標(biāo),。
3.反應(yīng)體系配置,無需冰塊:磚利的蛋白穩(wěn)定技術(shù),即使室溫保存有效期高達(dá)30天,。
4.無懼高GC含量PCR:獨(dú)*優(yōu)化的buffer配方,。
5.預(yù)防交叉污染:內(nèi)含dUTP,可匹配尿嘧啶糖苷酶(UNG)使用,。
6.廣泛的設(shè)備兼容性:如上
試劑盒組分:
1.5x One-step Multiplex Probe Mix:
HOT FIREPol® DNA聚合酶,反應(yīng)緩沖液, dNTPs(含dUTP), 15 mM MgCl2 (終濃度為3 mM MgCl2)
2.40x One-step SOLIScript Mix:
SOLIScript逆轉(zhuǎn)錄酶, RiboGrip RNase Inhibitor(RNase強(qiáng)效結(jié)合蛋白,,抑制RNA降解)
3.Water(無核酸酶)
可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:
對提取的人來源的總RNA進(jìn)行5個(gè)濃度梯度的10倍稀釋(每個(gè)反應(yīng):4000pg/ul - 0.4pg/ul),,各濃度樣品均使用Solis BioDyne的一步法多重PCR試劑盒,同時(shí)分析4個(gè)靶標(biāo),。PCR儀器為:Applied BioSystems™ QuantStudio™ 6 cycler,。
除了上述的的分子診斷研發(fā)神器,Solis BioDyne為客戶提供終點(diǎn)PCR(end-point PCR),,qPCR(real-time PCR),,反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse transcription),以及其它PCR所需的配套試劑,。產(chǎn)品線縱覽圖如下:
Solis BioDyne來源于歐盟-愛沙尼亞共和國,,自1995年以來,Solis BioDyne一直致力于開發(fā)和生產(chǎn)高品質(zhì)的生命科學(xué)試劑,,現(xiàn)已成為當(dāng)今歐洲領(lǐng)*的試劑供應(yīng)商之一,。高標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)和服務(wù)使Solis BioDyne成為值得信賴的首*PCR供應(yīng)商。我們的DNA聚合酶,,PCR Master Mixes,,qPCR Mixes和其它試劑被110多個(gè)國家的研究者所使用,包括頂*研究機(jī)構(gòu)和生物技術(shù)公司,。
Solis BioDyne擁有獨(dú)*的蛋白質(zhì)穩(wěn)定技術(shù)磚利,,確保其PCR酶與PCR Mixes產(chǎn)品具有*的穩(wěn)定性,研究者可以常溫運(yùn)輸以及常溫下配置PCR反應(yīng)體系(無需冰盒),。即使是室溫放置30天,,其酶活性也沒有損耗。
作為Solis BioDyne在中國的區(qū)域總代理,,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Solis BioDyne產(chǎn)品以及訂制服務(wù),。
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溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。