安捷倫熒光分光光度計(jì)是一種定性,、定量分析的儀器,。其能提供包括激發(fā)光譜,、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率,、熒光壽命,、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況,。通過對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系,。
安捷倫熒光分光光度計(jì)的構(gòu)造:
1)光源
為了便于選擇激發(fā)光的波長(zhǎng),,要求激發(fā)光源是能夠在很寬的波長(zhǎng)范圍內(nèi)發(fā)光的連續(xù)光源。在紫外-可見光區(qū),,熒光光譜儀的光源常用氙弧燈,。
2)樣品池
熒光儀用的樣品池材料要求無熒光發(fā)射,通常用熔融石英,,樣品池的四壁均光潔透明,。對(duì)固體樣品,通常將樣品用石英片固定于樣品夾的底部表面,,使之與入射光和出射光都成45°夾角放置,。
3)單色器
有兩個(gè)單色器:激發(fā)單色器和發(fā)射單色器。單色器一般為光柵和干涉濾光片,;濾光片可分為玻璃濾光片,、膠膜濾光片和干涉濾光片3種。
4)檢測(cè)器
一般為光電管或光電倍增管檢測(cè)器,,二極管陣列檢測(cè)器,、電荷耦合器件陣列檢測(cè)器以及光子計(jì)數(shù)器等。
安捷倫熒光分光光度計(jì)的特點(diǎn):
?。?)主要特點(diǎn)是靈敏度高,、選擇性好,靈敏度要比吸收光譜測(cè)量高2-3個(gè)數(shù)量級(jí),。
?。?)強(qiáng)選擇性強(qiáng),熒光物質(zhì)具有兩種特征光譜:激發(fā)光譜和吸收光譜,,相對(duì)于分光光度法單一的吸收光譜來說,,熒光光譜可根據(jù)激發(fā)光譜和發(fā)射光譜來鑒定物質(zhì)。
?。?)信息量豐富,,能提供熒光物質(zhì)的多種參數(shù)。
?。?)但是熒光分析方法也有其不足之處:①很多物質(zhì)本身不發(fā)熒光,;②熒光的產(chǎn)生與化合物結(jié)構(gòu)的關(guān)系不明確,;③干擾因素多,光分解,、氧淬滅,、易污染。
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