Agilent1260液相色譜的基本分離原理
在色譜法中存在兩相，一相是固定不動(dòng)的,，我們把它叫做固定相,；另一相則不斷流過(guò)固定相，我們把它叫做流動(dòng)相,。
色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù),、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離的。
使用外力使含有樣品的流動(dòng)相（氣體,、液體）通過(guò)一固定于柱中或平板上,、與流動(dòng)相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí),，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用,。
由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小,、強(qiáng)弱不同,，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡,，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同,，從而按一定次序由固定相中先后流出,。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè),。
Agilent1260液相色譜脫氣方法
1.為什么要脫氣
流動(dòng)相溶液往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡,。氣泡進(jìn)入檢測(cè)器后會(huì)在色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪音峰。小氣泡慢慢聚集后會(huì)變成大氣泡,，大氣泡進(jìn)入流路或色譜柱中會(huì)使流動(dòng)相的流速變慢或出現(xiàn)流速不穩(wěn)定,，致使基線起伏。氣泡一旦進(jìn)入色譜柱,排出這些氣泡則很費(fèi)時(shí)間,。在熒光檢測(cè)中,溶解氧還會(huì)使熒光淬滅,。溶解氣體還可能引起某些樣品的氧化或使溶液pH值發(fā)生變化。
2.脫氣方法
目前,，Agilent1260液相色譜流動(dòng)相脫氣使用較多的是離線超聲波振蕩脫氣,、在線惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣。
超聲波振蕩脫氣：將配制好的流動(dòng)相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min,。這種方法比較簡(jiǎn)便,，又基本上能滿足日常分析操作的要求，所以,，目前仍廣泛采用,。
惰性氣體鼓泡吹掃脫氣：將氣源（鋼瓶）中的氣體（氦氣）緩慢而均勻地通入儲(chǔ)液罐中的流動(dòng)相中，氦氣分子將其它氣體分子置換和頂替出去,，而它本身在溶劑中的溶解度又很小,，微量氦氣所形成的小氣泡對(duì)檢測(cè)無(wú)影響。
真空脫氣裝置：將流動(dòng)相通過(guò)一段由多孔性合成樹(shù)脂膜制造的輸液管,，該輸液管外有真空容器,，真空泵工作時(shí)，膜外側(cè)被減壓,，分子量小的氧氣,、氮?dú)狻⒍趸季蜁?huì)從膜內(nèi)進(jìn)入膜外而被脫除,。一般的真空脫氣裝置有多條流路,，可同時(shí)對(duì)多個(gè)溶液進(jìn)行脫氣。
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