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細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,，然后,，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng),。如果細(xì)胞被污染,，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃,、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等,。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,，生長狀態(tài)良好,，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化,，那么,，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：
(1)細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,，反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,，不宜細(xì)胞生長;
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格,?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),，可能是原代組織中的雜質(zhì),，多次傳代可以消除。

細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?

(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴,。
(3) 培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗,。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的*時(shí)機(jī)，細(xì)胞切勿生長過老,。

小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?

血清保存和使用須注意：血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,，若存放在4℃不可超過一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,，應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,，并經(jīng)常搖勻使之溶解，然后至室溫放置使之升溫,，不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,，如放在37℃解凍，顏色加深,，粘稠度也會(huì)增加,，血清在解凍和熱滅活后，應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,，避免反復(fù)凍融,。

胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別：

這三種血清的成份,，總體沒有什么明顯差別,，只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān)，如上述有人說的抗體等很少,。此外,，因生長發(fā)育的需要,，有些成分在小牛出生后會(huì)發(fā)生一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別,。有一點(diǎn)可以肯定,，胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。

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