支原體在自然界廣泛存在,尤其可以寄生于人,、哺乳動物,、植物、昆蟲等物種,。人的口腔,、鼻腔、皮膚,、呼吸道等均可攜帶支原體,。在細(xì)胞間里,支原體對培養(yǎng)細(xì)胞的污染風(fēng)險不容忽視,,這不僅因為常規(guī)的抗生素對支原體無效,,而且因為污染早期也沒有顯著表現(xiàn)。一旦發(fā)生污染,,支原體會影響細(xì)胞基因表達(dá)和營養(yǎng)代謝改變,,嚴(yán)重干擾實驗結(jié)果(包括細(xì)胞轉(zhuǎn)染和病毒包被)??梢允褂?/span>支原體清除劑,。支原體清除劑的工作濃度:
1.將支原體清除劑添加到被支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物中,濃度建議為5g/ml,,并培養(yǎng)1周,;
2.只有當(dāng)推薦濃度對去除支原體無效時,才能將支原體去除劑濃度提高至10g/ml,;
3.對于培養(yǎng)基更換或培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移(傳代),,使用含有相同濃度支原體清除劑的培養(yǎng)基,;
4.在不使用支原體清除劑的情況下轉(zhuǎn)移細(xì)胞培養(yǎng)物數(shù)次,并確認(rèn)污染支原體沒有再生,。
支原體清除劑的細(xì)胞毒性較低,,但是,當(dāng)用支原體去除劑處理時,,高度受支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物可能會表現(xiàn)出細(xì)胞特性的改變或?qū)?xì)胞毒性抗生素的敏感性,,因此,在這些情況下,,建議在處理后檢查預(yù)期的細(xì)胞特性,。