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elisa試劑盒的17個(gè)相關(guān)操作技巧

閱讀:1271        發(fā)布時(shí)間:2022/4/13
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   elisa試劑盒檢測技術(shù)已廣泛用于免疫學(xué),、微生物學(xué),、寄生蟲學(xué)等,。由于其具有靈敏度高,、試劑穩(wěn)定,、設(shè)備簡單、操作安全等優(yōu)點(diǎn),近幾年也將其應(yīng)用到食品領(lǐng)域中來檢測某些食品中的生理活性物質(zhì),。elisa試劑盒的17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
  2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長,。
  3.在吸取液體時(shí),,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差,。
  4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度,。
  5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
  6.為防止樣品蒸發(fā),,試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,,請于2-8℃保存,。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液,。
  8.ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),,要分批操作,。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長,,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,,難以清洗*。
  9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。
  10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈,。
  11.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4,。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零,。
  12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,,防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13.對樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗(yàn)證,。
  14.沒有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,,切勿使用自來水,。
  15.在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
  16.吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確,。
  17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差,。

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