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Gibco胎牛血清的四個(gè)制備流程
GIBCO胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中；因此,，胎牛血清應(yīng)用很廣泛,。比如，胎牛血清能夠用在科研,、工業(yè)生產(chǎn),、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。其中含有蛋白質(zhì),、氨基酸,、葡萄糖、激素等,，其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白,。氨基酸有多種，是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,，其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),，必須由培養(yǎng)液提供。
GIBCO胎牛血清功能：
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能,。
1,、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物,。
2,、提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素,、脂類,、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。
3,、起酸堿度緩沖液作用。
4,、是細(xì)胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5,、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,，起到解毒作用。
6,、提供蛋白酶抑制劑,，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害,。
Gibco胎牛血清的四個(gè)制備流程：
1,、血清來源：可從世界各國(guó)收集胎牛血清，但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,，有說明血清質(zhì)量的證明資料：包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況,。
2,、血清的收集：胎牛血清是心臟穿刺取血，新生牛(10～14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血,。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)：低溫下采集,、一次分離、分離后立即混合凍存,。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活,。
3、血清的制備：
a. 超低IgG胎牛血清：通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,，使FBS γ球蛋白含量減到低,，一般IgG≤5ug/ml，生物學(xué)活性不變,。
b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測(cè)定),。
c. γ-射線照射：已經(jīng)證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒,、支原體。照射劑量為30～45KG,。而且這個(gè)劑量的γ-射線照射不會(huì)改變血清的理化性質(zhì)和對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響,。
4、除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜,。FBS要通過三層0.1微米濾膜,，其他血清可通過0.2微米濾膜。
GIBCO胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e,、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽、脂肪,、碳水化合物、生長(zhǎng)因子,、激素,、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的,。