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如何培養(yǎng)羊水細(xì)胞
體外的羊水細(xì)胞與絨毛膜培養(yǎng)是每一個(gè)細(xì)胞遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室的重點(diǎn)工作，因?yàn)楹诵头治鏊璧闹衅冢╩etaphase）染色體有賴于獲得處于分裂狀態(tài)下的細(xì)胞,。羊水穿刺與絨毛膜取樣是現(xiàn)今主要的侵入性手段用于胎兒染色體異常的診斷,。用于胚胎期診斷化驗(yàn)中人類羊水細(xì)胞和絨毛膜樣品培養(yǎng)的*培養(yǎng)基，緩沖效果更佳,。培養(yǎng)基冷凍包裝,。
采用如下方法做羊水細(xì)胞原位培養(yǎng)或按其它常規(guī)羊水細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)羊水細(xì)胞：
1、取羊水20ml,，以120xg離心十分鐘,。
2、在無(wú)菌操作臺(tái)操作,，棄上清液,。
3、加入2ml羊水培養(yǎng)基,，輕輕 混勻,，制成細(xì)胞懸液。
4,、取35mm培養(yǎng)皿,，在蓋子上面及下半部側(cè)壁都做好標(biāo)記。（包括編號(hào)、姓名,、日期等）
5,、滴加0.5ml細(xì)胞懸液至培養(yǎng)皿中的蓋玻片（25px2）中央，用移液管尖小心攤開(kāi),。注意液體不能流出蓋玻片,。
6、將培養(yǎng)皿置于5% CO2,、濕度飽和的37度培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),。
7、24小時(shí)后,，給每塊蓋玻片補(bǔ)加1.5ml培養(yǎng)基,。
8、接種7天后觀察細(xì)胞,。當(dāng)發(fā)現(xiàn)蓋玻片上細(xì)胞克隆數(shù)大于10個(gè),，每個(gè)克隆細(xì)胞數(shù)大于300且克隆邊沿細(xì)胞呈旺盛分裂狀態(tài)時(shí)，即可收獲細(xì)胞,。否則,，繼續(xù)培養(yǎng)1~2天。當(dāng)克隆邊沿細(xì)胞融合度大于90%,，呈現(xiàn)停止分裂狀態(tài)時(shí),，意味細(xì)胞已經(jīng)老化，不適合用作分析,。
9,、適合收獲的細(xì)胞按常規(guī)方法使細(xì)胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細(xì)胞片，經(jīng)吉姆薩染色處理后做染色體核型分析,。
采用如下方法做羊水細(xì)胞原位培養(yǎng)或按其它常規(guī)羊水細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)羊水細(xì)胞：
1、取羊水20ml,，以120xg離心十分鐘,。
2、在無(wú)菌操作臺(tái)操作,，棄上清液,。
3、加入2ml羊水培養(yǎng)基,，輕輕 混勻,，制成細(xì)胞懸液。
4,、取35mm培養(yǎng)皿,，在蓋子上面及下半部側(cè)壁都做好標(biāo)記。（包括編號(hào)、姓名,、日期等）
5,、滴加0.5ml細(xì)胞懸液至培養(yǎng)皿中的蓋玻片（25px2）中央，用移液管尖小心攤開(kāi),。注意液體不能流出蓋玻片,。
6、將培養(yǎng)皿置于5% CO2,、濕度飽和的37度培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),。
7、24小時(shí)后,，給每塊蓋玻片補(bǔ)加1.5ml培養(yǎng)基,。
8、接種7天后觀察細(xì)胞,。當(dāng)發(fā)現(xiàn)蓋玻片上細(xì)胞克隆數(shù)大于10個(gè),，每個(gè)克隆細(xì)胞數(shù)大于300且克隆邊沿細(xì)胞呈旺盛分裂狀態(tài)時(shí)，即可收獲細(xì)胞,。否則,，繼續(xù)培養(yǎng)1~2天。當(dāng)克隆邊沿細(xì)胞融合度大于90%,，呈現(xiàn)停止分裂狀態(tài)時(shí),，意味細(xì)胞已經(jīng)老化，不適合用作分析,。
9,、適合收獲的細(xì)胞按常規(guī)方法使細(xì)胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細(xì)胞片，經(jīng)吉姆薩染色處理后做染色體核型分析,。