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總結Hyclone胎牛血清的相關知識點
Hyclone胎牛血清使用方法：
在細胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,，常使用的Hyclone澳洲胎牛血清濃度是10%,。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續(xù)實驗的結果,，我們在實驗中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細胞,，效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Hyclone FBS或者20%的Hyclone胎牛血清,，要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度,。
HyClone胎牛血清保存方法：
(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.
(2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.
(3)血清解凍：瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀。
如何避免HyClone胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：
(1)解凍血清時,，請隨時將之搖晃均勻,，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。
(2)血清分裝凍存時,，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一,。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀,。
(4)勿將血清置于37℃太久,，否則血清會變得渾濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,，從而影響血清的品質,。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要,，可以無須做此步驟,。
(6)若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃,，30分鐘的原則,，并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多,。