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人源細胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程

閱讀:1893        發(fā)布時間:2020/5/19
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   人源細胞系作為體外模型而被廣泛應用于生物醫(yī)學研究,。正確數(shù)據(jù)的獲得常依賴于細胞系的特性,,尤其是當它用來替代其來源者的組織時。
  人源細胞系常規(guī)培養(yǎng)傳代流程:
 ?。?)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,,通??刂圃?-2min)
  (2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,,定期換液(每周2-3次),,待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
  (3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
 ?。?)鏡下觀察消化情況,,在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,,盡量把細胞層吹落,,吹散。
  人源細胞系的培養(yǎng)注意事項:
  1.傳代培養(yǎng)時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染,,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰,。每次只進行一種細胞的操作,。每一種細胞使用一套器材,培養(yǎng)用液應嚴格分開,。
  2.每天觀察細胞形態(tài),,掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,,生長致密時即可傳代,。
  3.如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象,應立即采取措施,,一般應棄置污染的細胞,,如果必須挽救,可加含有抗生素的BSS或培養(yǎng)基反復清洗,,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗菌素,,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基等。
  人源細胞系的相關(guān)資料就先介紹到這里了,,如果您還想要了解更多內(nèi)容,,還請多多關(guān)注好我們,小編會不定期在此跟大家來分享的,,相信這些內(nèi)容對您的了解也是有一定幫助的,。

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