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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見問(wèn)題及其解答
1.如何選用培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件,。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng),?？傊琈EM做粘附細(xì)胞培養(yǎng) ,、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，各種目的無(wú)血清培養(yǎng)的是AIM V培養(yǎng)基(SFM)。
2.為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺,，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,。在進(jìn)行免疫學(xué) 研究,、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),，推薦使用熱滅活血清,。
3.L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng) 中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng) 時(shí)是重要的。脫掉氨基后,，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源,、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解,，但是確切的降解率一直沒有終確定,。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性,。
4.GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定 ?
GlutaMAX-I二肽是L-谷氨酰胺的衍生物,，將其不穩(wěn)定的α-氨基用L-丙氨酸來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,，釋放L-谷氨酰胺供利用,。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘,，GlutaMAX-I二肽溶液有小的降解,，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎*降解,。