優(yōu)等胎牛血清的使用是有自己的一套方法的
分析關(guān)于優(yōu)等胎牛血清的使用方法:
1、血清必須貯存-20℃,,如存放于4℃,,請勿超過兩周,對于某些單位一次無法用完一瓶,,可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中,,由于血清解凍時體積會增加10%,必須預(yù)留此膨脹體積的空間,,否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形,。
2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量,,因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝,,一般以50 ml無菌離心管中分裝40-45ml。使用過程中要特別注意,,必須規(guī)則地將血清搖晃均勻,,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由-20℃放置至37℃環(huán)境下解凍,因?yàn)闇囟雀淖兲?,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而產(chǎn)生沉淀,。
3、優(yōu)等胎牛血清的滅活一般是指56℃,,30分鐘水浴加熱已*解凍的血清,,加熱過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。此處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分去活化,。但是,,經(jīng)過滅活處理的血清會因而造成沉淀的顯著增多,且會影響血清的品質(zhì)。所以,,有的公司所生的細(xì)胞培養(yǎng)用牛血清不做滅活處理,,由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過濾前進(jìn)行過滅活處理,。
4,、在使用血清的時候,勿將血清留置于37℃太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分會因而受到破壞,影響血清的品質(zhì),。
5,、一般我們在使用過程中是先過濾培養(yǎng)基,再加血清,,勿直接過濾血清。
優(yōu)等胎牛血清由未出生的牛的血制成,;新生牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛,;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,,胎牛血清是品質(zhì)較高的,,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體,、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分少,。血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,,但還有一部分尚不清楚,,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡,、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異,。優(yōu)等胎牛血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素,、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,。