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熒光染色法中常用的熒光染料有以下幾種

時(shí)間:2025-5-26閱讀:154
熒光染色法中常用的熒光染料有以下幾種


  • Calcein - AM

    • 特性:本身無熒光,,進(jìn)入活細(xì)胞后,,被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成有綠色熒光的 Calcein,可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,,激發(fā)波長為 495nm,發(fā)射波長為 515nm,。

    • 優(yōu)點(diǎn):細(xì)胞毒性低,,能快速進(jìn)入細(xì)胞,染色效果穩(wěn)定,,可用于長時(shí)間觀察細(xì)胞。

    • 應(yīng)用:常用于細(xì)胞活性檢測,、細(xì)胞追蹤以及細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化的研究等。

  • 碘化丙啶(PI)

    • 特性:一種核酸染料,,不能透過活細(xì)胞的細(xì)胞膜,但可進(jìn)入死細(xì)胞,,與雙鏈 DNA 結(jié)合后,,在 488nm 激光激發(fā)下發(fā)出紅色熒光,,發(fā)射波長為 617nm。

    • 優(yōu)點(diǎn):與 DNA 結(jié)合特異性高,,熒光強(qiáng)度高,可用于區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,。

    • 應(yīng)用:常用于細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期分析以及死活細(xì)胞鑒別等實(shí)驗(yàn),。常與其他活細(xì)胞熒光染料如 Calcein - AM 等聯(lián)合使用,,通過不同顏色熒光區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,。

  • Hoechst 染料(如 Hoechst 33342、Hoechst 33258)

    • 特性:可穿透細(xì)胞膜,,與 DNA 特異性結(jié)合,在紫外光激發(fā)下發(fā)出藍(lán)色熒光,。其中,Hoechst 33342 染色效果較好且細(xì)胞毒性相對(duì)較低,,激發(fā)波長為 350nm,發(fā)射波長為 461nm。

    • 優(yōu)點(diǎn):能對(duì)活細(xì)胞和固定細(xì)胞進(jìn)行染色,,可用于觀察細(xì)胞核形態(tài)和細(xì)胞周期分布,。

    • 應(yīng)用:常用于細(xì)胞凋亡檢測,、染色體分析以及細(xì)胞定位研究等。

  • 吖啶橙(AO)

    • 特性:一種堿性熒光染料,,可透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,,與細(xì)胞內(nèi)的 DNA 和 RNA 結(jié)合,。在不同的酸堿度環(huán)境下,AO 與 DNA 和 RNA 結(jié)合后發(fā)出不同顏色的熒光,。在 pH 7.4 的環(huán)境中,AO 與雙鏈 DNA 結(jié)合發(fā)出綠色熒光,,與單鏈 RNA 結(jié)合發(fā)出紅色熒光,,激發(fā)波長為 488nm,發(fā)射波長分別為 530nm(綠色)和 640nm(紅色),。

    • 優(yōu)點(diǎn):能同時(shí)對(duì)細(xì)胞中的 DNA 和 RNA 進(jìn)行染色,通過觀察不同顏色的熒光,,可了解細(xì)胞內(nèi)核酸的分布和狀態(tài),。

    • 應(yīng)用:常用于細(xì)胞凋亡檢測,、細(xì)胞自噬研究以及區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等。在細(xì)胞凋亡過程中,,細(xì)胞核內(nèi)的 DNA 會(huì)發(fā)生斷裂,,由雙鏈變?yōu)閱捂湥灌こ热旧罂捎^察到細(xì)胞核由綠色熒光變?yōu)榧t色熒光,。



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