電泳儀的操作步驟中,，處理樣品時有哪些注意事項,？
在電泳儀操作步驟中，處理樣品時的注意事項主要包括以下幾個方面：
保持生物活性：如果樣品是生物組織或細胞中的蛋白質(zhì),、核酸等生物大分子,，在收集過程中要盡量保持其生物活性，避免使用過熱,、過酸,、過堿等可能導致生物大分子變性的條件。例如,，在提取蛋白質(zhì)時,，要在低溫環(huán)境下進行，并加入蛋白酶抑制劑,，防止蛋白質(zhì)被降解,。
防止核酸酶污染：對于核酸樣品，要特別注意防止核酸酶的污染,，因為核酸酶會降解核酸,。所有用于核酸處理的試劑和器材都要經(jīng)過嚴格的滅菌處理,，并且要避免樣品與手指等可能帶有核酸酶的物體接觸。
合適的保存條件：收集到的樣品若不能立即進行電泳分析,，需要根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇合適的保存條件,。一般來說，蛋白質(zhì)樣品可以在 - 20℃或 - 80℃下冷凍保存,，但要注意避免反復(fù)凍融,，以免蛋白質(zhì)變性；核酸樣品則可以在 - 20℃保存,，對于長期保存的 DNA 樣品,，也可以加入適量的無水乙醇，在 - 80℃下保存,。
選擇合適的溶劑：根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇合適的溶劑來溶解樣品,。對于蛋白質(zhì)樣品，常用的溶劑有 Tris - HCl 緩沖液,、PBS 緩沖液等,，并且要根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點調(diào)整緩沖液的 pH 值，使蛋白質(zhì)能夠充分溶解并帶上適當?shù)碾姾?。對于核酸樣品,，一般使?TE 緩沖液（Tris - EDTA 緩沖液）來溶解，EDTA 的作用是螯合金屬離子,，防止核酸酶對核酸的降解,。
控制濃度：樣品的濃度要適中，過濃的樣品可能導致電泳條帶拖尾,、變形或分辨率降低,，過稀的樣品則可能無法檢測到清晰的條帶。在進行電泳之前,，需要通過定量分析方法（如蛋白質(zhì)定量的 Bradford 法,、BCA 法，核酸定量的紫外分光光度法等）準確測定樣品的濃度,，并根據(jù)實驗要求進行適當?shù)南♂尅?/p>
緩沖液的選擇：加入的緩沖液要與電泳緩沖液相匹配,，以保證在電泳過程中樣品所處的環(huán)境 pH 值穩(wěn)定。不同的電泳體系需要使用不同的緩沖液,，如 SDS - PAGE 電泳常用 Tris - 甘氨酸緩沖液,，而等電聚焦電泳則需要使用專門的兩性電解質(zhì)緩沖液。
添加劑的使用：根據(jù)實驗?zāi)康?，可能需要在樣品中加入一些添加劑,。例如，在蛋白質(zhì) SDS - PAGE 電泳中,，需要加入十二烷基硫酸鈉（SDS）和 β - 巰基乙醇等,。SDS 可以使蛋白質(zhì)變性并帶上負電荷,，β - 巰基乙醇則可以還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵，使蛋白質(zhì)亞基充分分離,。在核酸電泳中,，有時會加入溴化乙錠（EB）等染料，以便在電泳后能夠通過紫外光照射觀察核酸條帶,，但要注意 EB 是一種強致癌物質(zhì),，使用時需小心操作并做好防護,。
充分混合：加入緩沖液和添加劑后,，要充分混合樣品，使樣品中的成分均勻分布,?？梢允褂脺u旋振蕩器或移液器反復(fù)吹打等方法進行混合，但要注意避免產(chǎn)生過多的氣泡,，以免影響后續(xù)的加樣操作,。
離心處理：混合后的樣品一般需要進行離心處理，以去除可能存在的不溶性雜質(zhì)或氣泡,。離心速度和時間根據(jù)樣品的性質(zhì)和體積而定,，一般蛋白質(zhì)樣品可以在 10000 - 15000rpm 下離心 5 - 10 分鐘，核酸樣品則可以在較低的速度下（如 5000 - 8000rpm）離心 3 - 5 分鐘,。離心后的樣品取上清液用于電泳加樣
8
