與其他 RNA 質(zhì)量評(píng)估試劑盒相比,,Invitrogen Qubit RNA IQ Assay Kit 具有多方面顯著優(yōu)勢(shì):
準(zhǔn)確性與特異性突出:該試劑盒采用 Invitrogen™ Molecular Probes™ 染料,這類染料有著分子識(shí)別特性,僅在與特異性靶分子 RNA 結(jié)合時(shí)才發(fā)射熒光信號(hào),。在復(fù)雜的樣本環(huán)境中,即使存在游離核苷酸或降解核酸,,也不會(huì)干擾對(duì)目標(biāo) RNA 的檢測(cè),,能精準(zhǔn)測(cè)量樣品中的 RNA 含量。在實(shí)時(shí)定量 PCR(qPCR)實(shí)驗(yàn)中,,若 RNA 含量測(cè)量不準(zhǔn)確,,會(huì)直接導(dǎo)致對(duì)基因表達(dá)量的錯(cuò)誤判斷;而在下一代測(cè)序法(NGS)中,,錯(cuò)誤的 RNA 起始數(shù)據(jù)可能使測(cè)序結(jié)果出現(xiàn)偏差,,無(wú)法準(zhǔn)確分析基因序列及變異情況。與之相比,,部分其他試劑盒易受雜質(zhì)干擾,,難以在復(fù)雜樣本中精準(zhǔn)識(shí)別目標(biāo) RNA,使得測(cè)量準(zhǔn)確性大打折扣 ,。
靈敏度:對(duì)于珍貴或來(lái)源極為有限的 RNA 樣本,,如微量的臨床穿刺樣本、單細(xì)胞 RNA,,或是從稀有生物物種中獲取的 RNA,,其寶貴性不容有失。Qubit RNA IQ Assay Kit 僅需 1μL 樣品,,便能精確可靠地定量濃度低至 10pg/μL 的 RNA,。這意味著在樣本量極少的情況下,科研人員仍能獲取準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果,,極大減少了樣本損耗,。一些同類試劑盒在面對(duì)低濃度 RNA 樣本時(shí),靈敏度不足,,無(wú)法準(zhǔn)確檢測(cè),,導(dǎo)致珍貴樣本浪費(fèi),且可能錯(cuò)過關(guān)鍵的研究信息。
操作簡(jiǎn)便快速:科研工作爭(zhēng)分奪秒,,時(shí)間成本極為關(guān)鍵,。使用該試劑盒時(shí),科研人員只需將 RNA 樣本加入 RNA IQ 工作液,,隨后用 Qubit 4 熒光計(jì)或 Qubit Flex 熒光計(jì)檢測(cè),,每個(gè)樣本檢測(cè)時(shí)間不到 5 秒。在高通量檢測(cè)場(chǎng)景中,,如大規(guī)?;虮磉_(dá)譜分析實(shí)驗(yàn),涉及成百上千個(gè) RNA 樣本的檢測(cè),,使用該試劑盒可大幅節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間與人力成本,。反觀部分其他試劑盒,操作流程繁瑣,,涉及復(fù)雜的樣本預(yù)處理、多步加樣及長(zhǎng)時(shí)間孵育等步驟,,檢測(cè)速度慢,,效率低下。
全面評(píng)估 RNA 質(zhì)量和完整性:區(qū)別于很多僅能檢測(cè) RNA 濃度的試劑盒,,它使用兩種特殊染料,,一種專門結(jié)合大的、完整的和 / 或高度結(jié)構(gòu)化的 RNA(如 mRNA,、tRNA,、rRNA),另一種選擇性結(jié)合小的和 / 或降解的 RNA,。通過計(jì)算得出 RNA IQ 值(范圍 1 到 10),,直觀反映 RNA 樣本中完整 RNA 與降解 RNA 的比例,讓科研人員快速掌握 RNA 質(zhì)量和完整性,。在 mRNA 疫苗研發(fā)中,,需要嚴(yán)格把控 mRNA 的質(zhì)量,確保其完整性,,以保障疫苗有效性和安全性,,該試劑盒的 RNA IQ 值能為研發(fā)過程中的 mRNA 質(zhì)量評(píng)估提供關(guān)鍵參考。其他多數(shù)試劑盒缺乏對(duì) RNA 完整性的有效評(píng)估手段,,無(wú)法滿足對(duì) RNA 質(zhì)量要求嚴(yán)苛的實(shí)驗(yàn)需求,。
結(jié)果可靠且與傳統(tǒng)方法相關(guān)性良好:該試劑盒基于溶液的檢測(cè)方法,結(jié)果與電泳等傳統(tǒng)方法相關(guān)性佳,。但它避免了電泳中跑膠,、成像等繁瑣操作,以及微流控方法中復(fù)雜的樣本制備過程,。在 RNA 質(zhì)量初篩時(shí),,若科研人員僅需快速判斷 RNA 是否降解,,使用該試劑盒可高效完成;而當(dāng)需要詳細(xì)了解 RNA 片段大小信息或尺寸分布時(shí),,傳統(tǒng)的基于凝膠或微流控的電泳方法仍是選擇,。但在多數(shù)常規(guī) RNA 質(zhì)量評(píng)估場(chǎng)景下,該試劑盒在節(jié)省時(shí)間和成本的同時(shí),,能給出可靠結(jié)果,,更具優(yōu)勢(shì) 。