安捷倫1260液相色譜 工作站的詳細操作方法

一,、開機：

1、打開電腦,；

2,、打開液相色譜各個模塊的電源；

3,、雙擊桌面“LC1260(Online)",，進入聯(lián)機界面；

二,、排氣：

1,、手動旋開泵處沖洗閥（逆時針旋轉(zhuǎn)約1圈）

2、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)銷售,，選擇“Method"選項,，進入泵編輯畫面，設(shè)流速：5ml/min,，點擊“確定",；

3、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo)銷售,，點擊“Control"選項,，選中“ON"，點擊“確定",，則系統(tǒng)開始沖洗,，直到

管線內(nèi)（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止（一般為5分鐘），切換通道繼續(xù)沖洗,，直到所有要用通道

無氣泡為止,；

4、右鍵單擊“Pump" 圖標(biāo),，點擊“Method"選項,，設(shè)流速：0ml/min，手動旋緊沖洗閥,；

5,、右鍵單擊“Pump"圖標(biāo)，點擊“Method"選項,，按照方法要求選擇合適比例的流動相,，設(shè)流速：1.0ml/min,；（不一定是1）；

6,、同理右鍵單擊“Column Comp",，“DAD"圖標(biāo)，點擊“Method"選項,，按照,；

7、方法的要求設(shè)置溫度,，波長,，點擊“控制" 選項，“ON"打開柱溫箱和檢測器,；

三,、編輯方法：

1、點擊“Method"—— “Edit EntireMethod"開始編輯完整方法,；

2,、選中除“Data Analysis "外的三項，進入下一選項卡,，選擇“Als"（自動進樣）,，點擊“OK"，進入下一選項,；

3,、選擇“Method"菜單下“Method Information"選項，在“Method Comments"中加入方法的信息（如：

This is for test!）,，選擇“OK",，進入下一選項；

4,、泵參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Pump"圖標(biāo),，點擊“Method…"選項，設(shè)置“Flow"：如1.0ml/min,；“Stop

Time"：如10 min（該停止時間僅為做一個樣品需要的時間）,，按照要求選擇合適比例的流動相配

比，選擇“OK",，進入下一選項,；

5,、自動進樣器參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Sampler"圖標(biāo),，點擊“Method"選項，選擇“Injection volume",，輸

入進樣體積,，選擇“OK",，進入下一選項；

6,、柱溫箱參數(shù)設(shè)定：右鍵單擊“Column Comp",，點擊“Method"選項，設(shè)置“Left"溫度（可設(shè)置溫度范

圍：低于室溫10℃-80℃）,，一般“Left"和“Right"溫度一致,，選擇“Combined"綁定即可，“Stop

Time"選擇“As Pump /Injector",，選擇“OK",，進入下一選項；

7,、UV檢測器參數(shù)設(shè)定: 右擊“DAD" ,，點擊“Method…"選項，下方的空白處輸入所需的檢測波長（可

根據(jù)需要選擇多個波長,，多可選8個波長）,；“Stop Time"選擇“As Pump /Injector"；“Spectrum"

——“Store"選項下,，根據(jù)需要選擇 “None"或“All（全波長掃描）"等選項,，選擇“OK"，進入下一選

項,；

8,、編輯方法完畢，從“Method"菜單中,，選中“Save Method As",，輸入一方法名，選擇“OK",，保存方

法成功,。

9、單針進樣

10,、從“Run Control"菜單中,，選擇“Sample Information"選項，輸入“Operator Name",；在“Data File"中

選擇“Path"和 “Prefix/Counter（文件命名）"設(shè)置“Prefix（一般設(shè)置為年月日）"和“Counter",；輸

入“Location（樣品位置）"和“Sample Name"，選擇“OK",，進入下一選項,；

11、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Method"選項,，開始進樣,。

四,、序列進樣：

1、選擇“Sequence"菜單下“ Sequence Table"選項,，在“Confiqure Table"中選擇需要選項,，一般

為“Vial(樣品瓶)"，“Sample Name(樣品名稱)",，“Method Name(方法名稱)",，“Inj/Vial（進樣次

數(shù)）"，“Sample Type（樣品類型）",，“Datafile（文件名）"和“Inj Volume（進樣體積）",；

2、點擊“Inset"生成一行,，設(shè)置上述參數(shù),，選中該行，點擊“Copy"和“Paste"復(fù)制后修改相應(yīng)參數(shù),，即

生成序列表,，選擇“OK"，進入下一選項,；

3,、點擊“Sequence"菜單下“ Sequence Parameters"選項，選擇序列數(shù)據(jù)的“Path"（序列會自動生成

以“序列名稱－時間"為名稱的文件夾保存數(shù)據(jù)）,，數(shù)據(jù)建議選擇 “Prefix/Counter"保存,；

在“Shutdown"選項下選中“Post-Sequence Command/Macro"，根據(jù)需要選擇“PUMPALL OFF（序列

結(jié)束后關(guān)閉泵）"" “LAMPALL OFF（序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈）"" “STANDBY（序列結(jié)束后關(guān)閉紫外燈

和泵）",，選擇“OK",，進入下一選項；（注：若“Path"中默認保存于C盤,，則可點擊“View",，選

擇“Preferences"，根據(jù)需要添加相應(yīng)的“SequenceTemplates"“Data"“Master Methods"保存路徑）

4,、從“Sequence"菜單,，選中“Save Sequence Template As"，輸入一序列名,，選擇“OK",，即可；

5,、基線平穩(wěn)后選擇“Run Control"中的“Run Sequence"選項,，開始序列進樣。

（注：若中途停止運行，則選擇“Run Control"中的“Stop Run/Inject/ Sequence"可保留圖譜信息,，若選

擇Abort，則所有圖譜信息都丟失）

五,、數(shù)據(jù)分析（脫機狀態(tài)使用）：

1,、雙擊“LC1260（Offline）"圖標(biāo)進入的脫機畫面

2、從“View"菜單中,，點擊“Data Analysis"進入數(shù)據(jù)分析畫面

3,、從“File"菜單選擇“Load Signal"，選中所需的數(shù)據(jù)文件名,，點擊“OK",，則數(shù)據(jù)被調(diào)出。

4,、譜圖優(yōu)化：從“Graphics"菜單中選擇“Signal Options",。從“范圍" 中選擇“Full"或“Use Ranges" 選擇

所需“Time Range"和“Response Range"，選擇“OK",；從“Integration"中選擇“Integration Events",，調(diào)

整“Area Reject"和“Height Reject"刪除雜峰；點擊“Set Integration"圖標(biāo),，可選擇性消除不需要的積

分,，若想消除該操作，則選擇“Method Manual Events"上排左起第5個圖標(biāo)進行移除操作即可,，點擊

左邊“√"圖標(biāo),，將積分參數(shù)存入方法并退出“Integration Events"。

（注：“Set Integration"圖標(biāo)為）

六,、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：

1,、選擇“Calibration"菜單下“New Calibration Table"，選擇“Automatic Setup"中“Level（即標(biāo)曲中對應(yīng)

的點,，個點即為1）"和“Defanlt Amount（標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)點的濃度）",，選擇“OK"；

2,、通過選擇“Calibration"菜單下的“Add Level"選項依次添加各點參數(shù),，若為外標(biāo)法，在“ISTD"項下

選“NO",，若為內(nèi)標(biāo)法則選“Yes",；“#"項下對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品和內(nèi)標(biāo)無的數(shù)字的應(yīng)統(tǒng)一；若想更改標(biāo)準(zhǔn)曲線中

的對應(yīng)點,；

3,、選擇“Calibration"菜單下的“Recalibrate"項的“Mode"選項，選擇“Average"則表示取當(dāng)前點與標(biāo)曲

中對應(yīng)點的平均值替代標(biāo)曲中原對應(yīng)點，若選擇“Replace"則表示將當(dāng)前點取代標(biāo)曲中對應(yīng)點,；

（注：修改“Defanlt Amount"中濃度單位的方法：選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",，修

改“Amount Units"，設(shè)置濃度單位,；選擇“Calibration"項下“Calibration Setting",，修改“Default

CalibrationCurve"，選擇合適的曲線類型-Type,，是否過原點-Origin和各點對于標(biāo)準(zhǔn)曲線的比重-

Weight,，通常選Equal）

4、調(diào)出樣品譜圖,，點擊需要計算濃度的色譜峰,，選擇“Report" 菜單中的“Specify Report"，選

擇“Report style"為“Detail",，點擊“OK"后選擇“打印預(yù)覽"圖標(biāo),，在報告中即可體現(xiàn)計算結(jié)果。

七,、 圖譜重疊設(shè)置：

1,、選擇“File"菜單下“Overlay Signal"選項，選擇任意需要重疊的圖譜,；

2,、在“Signal"選項下，選擇“3D Signal Overlay"圖標(biāo)（緊鄰圖譜上方左起第四個圖標(biāo)）,，在彈出

的“Adjust Signal OverlayOptions"對話框中調(diào)節(jié)交錯時間和高度,；若想移除重疊譜圖，點擊第六個圖

標(biāo),。

八,、信噪比等參數(shù)計算：

1、選擇“Report"菜單中的“System Suitability"項下的“Edit Noise Range"選項,，設(shè)置時間范圍（超過

1min）,；

2、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report",，選擇“Report style"為“Perfomance+Noise",，點

擊“OK"后，即可預(yù)覽信噪比參數(shù),；

3,、選擇“Report" 菜單中的“Specify Report"，選擇“Report style"為“Extended Perfomance",，點

擊“OK"后,，即可預(yù)覽對稱性、拖尾因子等所有參數(shù)。

九,、程序運行時檢測出峰情況：

選擇“File"菜單下的“Snapshot"選項即可,。

十、打印報告：

1,、從“Report"菜單中選擇“Report Mode",，選擇“Use Classic Reporting"；

2,、從“Report"菜單中選擇“打印報告"，則報告結(jié)果將被打印,。

十一,、關(guān)機：

1、沖洗色譜柱和系統(tǒng)后,，退出化學(xué)工作站及其它窗口,，關(guān)閉計算機；

2,、關(guān)閉Agilent 1260各模塊電源開關(guān),。