凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的種方法,。即在有催化劑的條件下,，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,，然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,，隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,，再以標準鹽酸滴定,，就可計算出樣品中的氮量,。由于蛋白質含氮量恒定，可由其氮量計算蛋白質含量,，故此法是經典的蛋白質定量方法,。
操作方法
1、樣品處理：稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當?shù)?0-40mg）,，移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及20毫升硫酸,，稍搖勻后于瓶口放小漏斗,，將瓶以45度角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上，小火加熱,，待內容物炭化,，泡沫停止后,，加強火力，并保持瓶內液體微沸,，至液體呈藍綠色澄清透明后,，再繼續(xù)加熱0.5小時。取下放冷,，小心加20ml水，放冷后,，移入100ml容量瓶中,，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中,，再加水至刻度,，混勻備用,。取與處理樣品相同量的硫酸銅,、硫酸鉀,、濃硫酸同方法做試劑試驗,。但是此法危險，不易在實驗室演示,，現(xiàn)在大多數(shù)實驗室有消煮儀次可以行多個（次可以消煮16個樣品）樣品處理,，并有通風櫥行通風，溫度可以自己設定,，更加安和可操作性,，因此逐步成為主要的凱氏定氮法的處理方法。
般消解溫度都設在240度及240度以上,，如果想快速消解可以適當提溫度甚至可以用zui大溫度行消解,。
2、按圖裝好定氮裝置,，于水蒸氣發(fā)生器內裝水約2/3處加甲基紅示劑數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸,，以保持水呈酸性，加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸,，用調壓器控制,，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內的水。
3,、向接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合示劑1滴,，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯入反應室,，并以10ml水洗滌小燒杯使入反應室內,，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯,，提起玻璃塞使其緩慢入反應室,，不能立即將玻璃蓋塞緊，這樣易使玻璃塞粘在樣口,，應用蒸餾水沖洗然后再蓋,，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,，開始蒸餾,，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而入接收瓶內，蒸餾5min,。移動接收瓶,，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min,，然后用少量水沖洗冷凝管下端外,。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標準溶液定至灰色或藍紫色為終點,。
同時吸取10.0ml試劑消化液按3操作。
