凱氏定氮法是測(cè)定化合物或混合物中總氮量的種方法,。即在有催化劑的條件下,，用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無(wú)機(jī)銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,，隨水蒸氣蒸餾出來(lái)并為過(guò)量的硼酸液吸收,，再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，就可計(jì)算出樣品中的氮量,。由于蛋白質(zhì)含氮量恒定,，可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量，故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法,。
操作方法
1,、樣品處理：稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當(dāng)?shù)?0-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,，加入0.2g硫酸銅,，6g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻后于瓶口放小漏斗,，將瓶以45度角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上,，小火加熱，待內(nèi)容物炭化,，泡沫停止后,，加強(qiáng)火力，并保持瓶?jī)?nèi)液體微沸,，至液體呈藍(lán)綠色澄清透明后,，再繼續(xù)加熱0.5小時(shí)。取下放冷,，小心加20ml水,，放冷后，移入100ml容量瓶中,，并用少量水洗定氮瓶,，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用,。取與處理樣品相同量的硫酸銅,、硫酸鉀、濃硫酸同方法做試劑試驗(yàn),。但是此法危險(xiǎn),，不易在實(shí)驗(yàn)室演示，現(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室有消煮儀次可以行多個(gè)（次可以消煮16個(gè)樣品）樣品處理,，并有通風(fēng)櫥行通風(fēng),，溫度可以自己設(shè)定，更加安和可操作性,，因此逐步成為主要的凱氏定氮法的處理方法,。
般消解溫度都設(shè)在240度及240度以上，如果想快速消解可以適當(dāng)提溫度甚至可以用zui大溫度行消解,。
2,、按圖裝好定氮裝置，于水蒸氣發(fā)生器內(nèi)裝水約2/3處加甲基紅示劑數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸,，以保持水呈酸性,，加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸,，用調(diào)壓器控制,，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶?jī)?nèi)的水。
3,、向接收瓶?jī)?nèi)加入10ml 2%硼酸溶液及混合示劑1滴,，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯入反應(yīng)室,，并以10ml水洗滌小燒杯使入反應(yīng)室內(nèi),，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯,，提起玻璃塞使其緩慢入反應(yīng)室,，不能立即將玻璃蓋塞緊，這樣易使玻璃塞粘在樣口,，應(yīng)用蒸餾水沖洗然后再蓋,，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾,，開始蒸餾,，蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過(guò)冷凝管而入接收瓶?jī)?nèi)，蒸餾5min,。移動(dòng)接收瓶,，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然后用少量水沖洗冷凝管下端外,。取下接收瓶,，以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液定至灰色或藍(lán)紫色為終點(diǎn)。
同時(shí)吸取10.0ml試劑消化液按3操作,。
