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高效液相色譜法具有高柱效,、高選擇性,、分析速度快、靈敏度高,、重復(fù)性好,、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的重要手段之一,，目前在化學(xué),、化工,、醫(yī)藥,、生化、環(huán)保,、農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用,。

和氣相色譜一樣，液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相——固定相和流動(dòng)相組成,。

一,、固定相
高效液相色譜固定相以承受高壓能力來分類，可分為剛性固體和硬膠兩大類,。

剛性固體以二氧化硅為基質(zhì),，可承受7.0×108~1.0×109Pa的高壓，可制成直徑,、形狀,、孔隙度不同的顆粒。如果在二氧化硅表面鍵合各種官能團(tuán),，可擴(kuò)大應(yīng)用范圍,，它是目前z`ui廣泛使用的一種固定相。

硬膠主要用于離子交換和尺寸排阻色譜中,，它由聚苯乙烯與二乙烯苯基交聯(lián)而成,。可承受壓力上限為3.5×10Pa,。固定相按孔隙深度分類,，可分為表面多孔型和全多孔型固定相兩類,。

1.表面多孔型固定相
它的基體是實(shí)心玻璃球，在玻璃球外面覆蓋一層多孔活性材料,，如硅膠,、氧化硅、離子交換劑,、分子篩,、聚酰胺等。這類固定相的多孔層厚度小,、孔淺,，相對(duì)死體積小，出峰迅速,、柱效亦高,；顆粒較大，滲透性好,，裝柱容易,，梯度淋洗時(shí)能迅速達(dá)到平衡，較適合做常規(guī)分析,。由于多孔層厚度薄,，大允許量受到限制。

2.全多孔型固定相
由直徑為10nm的硅膠微粒凝聚而成,。這類固定相由于顆粒很細(xì)（5~10um）,，孔仍然較淺，傳質(zhì)速率快,，易實(shí)現(xiàn)高效,、高速。特別適合復(fù)雜混合物分離及痕量分析,。

二,、流動(dòng)相
由于高效液相色譜中流動(dòng)相是液體，它對(duì)組分有親合并參與固定相對(duì)組分的競(jìng)爭(zhēng),，因此,，正確選擇流動(dòng)相直接影響組分的分離度。對(duì)流動(dòng)相溶劑的要求是：
（1）溶劑對(duì)于待測(cè)樣品,，必須具有合適的極性和良好的選擇性,。
（2）溶劑與檢測(cè)器匹配。對(duì)于紫外吸收檢測(cè)器,，應(yīng)注意選用檢測(cè)器波長(zhǎng)比溶劑的紫外截止波長(zhǎng)要長(zhǎng),。所謂溶劑的紫外截止波長(zhǎng)指當(dāng)小于截止波長(zhǎng)的輻射通過溶劑時(shí)，溶劑對(duì)此輻射產(chǎn)生強(qiáng)烈吸收，此時(shí)溶劑被看作是光學(xué)不透明的,，它嚴(yán)重干擾組分的吸收測(cè)量,。對(duì)于折光率檢測(cè)器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相,，以達(dá)到z`ui高靈敏度,。
（3）高純度
由于高效液相色譜靈敏度高，對(duì)流動(dòng)相溶劑的純度也要求高,。不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn),，或產(chǎn)生“偽峰”。
（4）化學(xué)穩(wěn)定性好
（5）低粘度（粘度適中）若使用高粘度溶劑,，勢(shì)必增高壓力,，不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮,、甲醇和乙腈等,；但粘度過低的溶劑也不宜采用，例如戊烷和yi醚等,，它們?nèi)菀自谏V柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡,，影響分離。